[發明專利]一種iNGR修飾的腦膠質瘤靶向自組裝RNAi納米給藥系統及其制備方法

有效

• 申請號: 201410304545.1
• 申請日: 2014-06-30
• 公開（公告）號: CN105267983B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 蔣晨;安賽
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K9/51;A61K47/26;A61K47/64;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發明屬生物技術領域，涉及一種iNGR修飾的腦膠質瘤靶向自組裝RNAi納米給藥系統及其制備。本發明利用人工合成的谷胱甘肽敏感的陽離子聚合物，對海綿狀疏松的RNAi納米球進行壓縮，并通過親水性聚合物修飾，構建了具備理想粒徑且還原敏感的RNAi納米給藥系統。本給藥系統自身既為載體又為藥物，能明顯提高體內siRNA的遞釋效率，有效降低體內免疫反應和毒副作用，保證該RNAi納米給藥體系的安全性。本給藥系統中的靶向頭基iNGR腫瘤穿透環肽，兼具良好的腫瘤新生血管靶向效果和腫瘤組織穿透能力，可有效地增加RNAi納米給藥系統在腫瘤細胞內的蓄積，實現優異的腦膠質瘤治療效果。

技術領域

本發明屬生物技術領域，涉及一種新型基因藥物遞送系統及其制備方法，具體涉及一種iNGR修飾的腦膠質瘤靶向自組裝RNAi納米給藥系統及其制備方法。

背景技術

現有技術報道了腦膠質瘤是最具破壞性的人類疾病之一。傳統的治療手段(如：手術切除、放療、化療等)普遍存在不可避免的副反應，效果欠佳且復發率高。有研究顯示，RNA干擾(RNAi)治療可以顯著降低腫瘤細胞內特定功能蛋白的表達從而抑制疾病的發生發展，并伴隨極少的副反應，已被廣泛接受為目前治療腦膠質瘤最為安全有效的方法。常見的RNAi治療是通過陽離子聚合物包封小干擾RNA(siRNA)實現的，然而，相對有限的包封效率、潛在的免疫反應、難生物降解的毒性以及非特異性的器官蓄積等明顯限制了其在腦膠質瘤治療領域的臨床應用。因此，為了實現更為安全有效的腦膠質瘤治療，亟需設計開發一種特異性腦膠質瘤靶向的內源性高載藥RNAi納米給藥系統。

研究報道，滾環轉錄(RCT)是一種獨特的體外RNA聚合反應，AUCG四種核苷酸以特定序列的引物分子為模板，在RNA聚合酶的作用下，不斷重復轉錄過程，形成一系列連續的小發夾RNA(shRNA)，并通過自組裝折疊形成海綿狀疏松的RNAi納米球(直徑約500nm)。RNAi納米球自身既為載體又為藥物，可攜帶大量siRNA序列入胞，而后胞內固有的酶切機制可將其生物降解為數百萬siRNA，充分發揮RNAi的治療作用。同時，由于RNA本身為人體內源性物質，可有效避免體內免疫反應，因此，該RNAi納米球是一種極具潛力的RNAi納米給藥系統。

為延長RNAi納米球在血液中的循環時間，實現顯著的EPR效應，增加腫瘤部位蓄積量，RNAi納米給藥系統需保持在特定的粒徑范圍。以OEI₈₀₀為聚合單元、DTSSP為linker，人工合成的聚合物pOEI(Mw18000)是一種谷胱甘肽敏感的陽離子聚合物，含有豐富的氨基末端及正電性，可將海綿狀疏松的RNAi納米球壓縮至理想粒徑范圍(直徑約100nm)，且在腫瘤細胞內高濃度谷胱甘肽的環境中可被特異性降解為OEI₈₀₀片段，重新暴露海綿狀疏松的RNAi納米球于腫瘤細胞酶切環境中，以實現后續的生物降解。因此，pOEI聚合物是一種極具潛力的還原敏感性RNAi納米球壓縮材料。

研究還顯示，血管生成在腫瘤的生長和轉移過程中起關鍵性作用。與正常血管相比，新生血管表面大量特異性功能蛋白過表達，可被廣泛開發應用為腫瘤靶向的新靶點。然而，對于有效的腫瘤靶向給藥系統，僅具備新生血管表面靶向特性是遠遠不夠的，能夠實現高效的血管滲出、穿透腫瘤組織、到達腫瘤細胞才是關鍵。

基于本領域現狀，本申請的發明人擬利用RCT技術設計合成可攜帶大量siRNA序列的自組裝RNAi納米球，構建一種新型高效的RNAi納米給藥系統。

發明內容

本發明的目的是為克服現有技術存在的缺陷，提供一種新型基因藥物遞送系統及其制備方法，具體涉及一種iNGR修飾的腦膠質瘤靶向自組裝RNAi納米給藥系統及其制備方法。本發明利用RCT技術設計合成可攜帶大量siRNA序列的自組裝RNAi納米球，構建了一種新型高效的RNAi納米給藥系統。

本發明利用人工合成的谷胱甘肽敏感的陽離子聚合物，對海綿狀疏松的RNAi納米球進行壓縮，并通過親水性聚合物修飾，構建了具備理想粒徑且還原敏感的RNAi納米給藥系統。