[發明專利]一株產阿魏酸酯酶的泡盛曲霉及其應用

無效

• 申請號: 201410299807.X
• 申請日: 2014-06-26
• 公開（公告）號: CN104087513A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 吳暉;胡博涵;賴富饒;劉素純;曾嵐
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/18;C12Q1/44;C12R1/665
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

技術領域

本發明涉及一株產阿魏酸酯酶的菌株及其應用，具體涉及一株產阿魏酸酯酶的泡盛曲霉及其應用。

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背景技術

小麥是世界上種植面積最為廣泛的作物之一，約占糧食作物種植面積的26%，我國小麥年產量高，小麥麩皮的年產量可達2000萬噸以上，但是一直以來對于麩皮的開發利用較少，基本上僅以作為飼料原料而加以利用。小麥麩皮中主要含有非淀粉多糖、淀粉、脂肪、木質素、蛋白質、維生素和酚類物質等多種成分，其中以阿拉伯木聚糖為主的非淀粉多糖含46%，是小麥細胞壁的主要成分。麩皮中還含有一定數量的酚酸類物質，如阿魏酸（ferulic?acid）、P-香豆酸(p-coumaricacid)、咖啡酸(caffeicacid)、芥子酸(sinapicacid)和丁香酸(syringicacid)等成分，其中以阿魏酸為主要成分，約為麩皮質量的0.4%-0.7%。阿魏酸主要通過酯鍵與細胞壁多糖和木質素項鏈，一般可以使用強堿將酯鍵斷開而釋放出來。

酚酸組要存在于麥麩皮層中，其具有較強的抗氧化活性和抗腫瘤作用，并對環境中的有毒物質如多環芳烴和亞硝酸胺以及真菌毒素有抗誘變作用。有研究報道發現，在麥麩膳食纖維的離體發酵試驗中，結腸微生物能通過發酵作用將結合在麥麩膳食纖維上的阿魏酸釋放出來。而阿魏酸可顯著降低人子宮頸癌細胞的生存能力、存活和抗氧化水平，同時提高癌細胞保內的活性氧水平并增加癌細胞的脂質過氧化及DNA損傷作用。另有報道認為阿魏酸可通過對血管內皮生長因子（VEGF)、血小板源生長因子（PDGF）和缺氧誘導因子（HIF）的作用來調節血管的形成。

目前，研究表明酚類物質主要以游離型、結合型和束縛型等幾種形式存在于植物機體內，一般來說，游離性和結合型酚類物質為可溶性酚類；束縛型則為不溶性酚類物質，以酯鍵、糖苷鍵和醚苷鍵形式與其他物質（包括蛋白質、糖類、有機酸等）相結合。

對于酚類物質的提取，一般采用有機溶劑為媒介，輔以超聲、微波、亞臨界等方法進行。由于束縛型酚類物質一般與其他物質以不同的鍵型相連結，傳統的提取方法不足以將酯鍵、糖苷鍵或醚鍵斷裂，因此對束縛型酚類物質的提取主要采用強酸強堿或生物方法（酶法和發酵法），其主要目的都是破壞細胞壁纖維成分致密的結構，以使束縛行酚類物質釋放出來。

盡管化學方法操作簡單、效率高，但是后續需要處理提取廢液，不利于可持續性發展。因此相比較而言，采用生物方法更符合綠色、環保的發展要求。對于麥麩進行發酵方面的多集中在低聚木糖生產和產酶活性等領域，另外已有大量文獻報道麥麩經發酵后等到膳食纖維功能性質比發酵前有大幅改善，如持水性、持油性和對有害物質的結合能力等。

阿魏酸作為麥麩中的主要酚酸，目前對其獲得的方式主要為酶法，以發酵方式的報道較少，特別需要指出的是，麥麩中的阿魏酸基本適宜束縛型的形態存在的，其游離型：結合型：束縛型的比例為0.1:1:100。近年來，對酚類物質存在形式的研究逐漸成為新的研究熱點。目前已對一些游離型、酯化型、糖苷型、束縛型酚類物質的提取、測定及抗氧化活性等方面的報道。酚類物質的存在形與其含量及抗氧化活性有重要關系，束縛型酚類物質不僅含量遠遠高于游離型和結合型，且抗氧化性活性和抑制DNA損傷方面要高于其他兩種類型。

本發明旨在利用微生物資源采用發酵工程技術將農業資源轉化形成人類社會需求的物質，解決抗氧化物質資源短缺的問題。

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發明內容

本發明所要解決的技術問題是：針對現有抗氧化供應的提供新的原料和方法，并對小麥等大宗植物進行再利用，提供一株產阿魏酸酯酶的泡盛曲霉及其應用，其可利用小麥麩皮發酵生產阿魏酸，由于微生物生長周期短、不受氣候限制，易于實現大規模生產，從而解決阿魏酸不足等問題。

本發明提供一株產阿魏酸酯酶的泡盛曲霉，來源于腐爛的橘子表皮，經過篩選，分離純化得到的。所述泡盛曲霉的分類命名為泡盛曲霉（Aspergillus?awamori）黑桔抑菌，由中國典型培養物保藏中心保藏，簡稱CCTCC，保藏編號為CCTCC?NO：M2013639，其ITS序列表如序列表1所示，保藏日期為2013年12月8日，保藏地址為中國?武漢?武漢大學，中國典型培養物保藏中心。