[發明專利]一種從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201410299702.4
• 申請日: 2014-06-27
• 公開（公告）號: CN104119419A
• 公開（公告）日: 2014-10-29
• 發明（設計）人: 高鴻;王潔;鐘凱;黃毅娜;朱一倫;高曉玲;徐正君;山口五十磨
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08;A23L3/3562
• 代理公司: 成都科海專利事務有限責任公司 51202
• 代理人: 鄧繼軒

技術領域

本發明涉及一種從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物Clematoside?S及其制備方法和用途，屬于植物化學化領域。

背景技術

三萜皂苷是由三萜皂苷元和糖組成的一類化合物，常見的苷元為四環三萜和五環三萜。三萜皂苷類化合物具有抗腫瘤作用、中樞神經系統作用、抗炎、抗菌、降低膽固醇及心血管活性等。該類化合物廣泛分布于雙子葉植物，如豆科、五加科、傘形花科、桔梗科、毛茛科。野棉花(Urena?lobata?L.)為錦葵科梵天花屬植物，主要分布于我國廣西、四川、云南、貴州。其根或全草可入藥，具有祛風利濕、活血消腫、清熱解毒等功效。研究表明，野棉花全草中含有氨基酸和蛋白質、糖類、皂苷、鞣質、酚類、有機酸類、黃酮類等成分(謝臻，陳勇，韋濤.地桃花化學成分預實驗及紫外-可見光譜研究[J].廣西科學院學報，2010，26(3)：225-227)。中國專利，ZL201210246966.4已報道了野棉花葉經柱層析后，甲醇洗脫組分有較強的酵母菌抑制活性，但未對其活性成分進行研究。因此，本發明對野棉花葉中具有抑菌活性的化合物進行了分離鑒定，首次分離得到了一種三萜皂苷類化合物Clematoside?S，并對其抑制食品腐敗酵母菌活性進行了測定。

在食品腐敗中，由微生物污染所引起的腐敗變質最為常見，由于食品性質、來源和加工處理不同，引起食品腐敗的微生物種類也有所差異，通常細菌、霉菌、酵母都能引起食品腐敗。酵母是一種單細胞真菌，屬于兼性厭氧菌。第一，它能在食品中產生的大量次級代謝產物如酒精、有機酸、酯類等，從而對食品的感官質量產生影響；第二，酵母具有降解膠質和淀粉的能力，破壞了食品的質感、粘性；第三，酵母能產生一些列揮發性含硫化合物，會影響食品的氣味和風味。因此，從天然產物中尋找具有酵母菌抑制活性的抑制劑已成為人們的研究熱點。也是該領域所期盼的研究、發展方向。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的不足而提供一種從野棉花葉中提取具有食品腐敗酵母菌抑制活性的三萜皂苷類化合物Clematoside?S及其制備方法和用途。其特點是從野棉花中制備食品腐敗酵母菌抑制劑的抑制效果好，其對不同種食品腐敗酵母菌顯示了較強的抑菌活性。

本發明的目的由以下技術實施實現，其中所述原料份數除特殊說明外，均為重量份數。

從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物Clematoside?S及其制備方法和用途，

從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物為Clematoside?S，其結構式如下：

從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物的方法包括以下步驟：

(1)將干燥野棉花葉粉碎，平均粒度為300～500μm，按料液比1g∶15～25mL加入正己烷，在室溫下震蕩18～30h，過濾、分離除去正己烷萃取液；

(2)將上述脫脂野棉花葉，按料液比1g∶20～30mL加入甲醇作為提取劑，在室溫下震蕩24～48h，分離上清液，并將上清液濃縮干燥后獲得甲醇浸膏；

(3)將上述甲醇浸膏懸浮于甲醇50～100mL，上大孔吸附樹脂Diaion?HP-20層析柱，用甲醇-水梯度洗脫，濃度為0wt％、20wt％、40wt％、60wt％、80wt％、100wt％，洗脫流速為2～4mL/min；

(4)分別收取各組分的甲醇洗脫液，濃縮干燥后得到樣品，用制備高效液相色譜繼續分離純化得到化合物：制備色譜的分離條件：色譜柱為制備柱，流動相為水和甲醇，等度洗脫；

(5)將上述步驟(3)或步驟(4)收集的100wt％甲醇洗脫液，濃縮干燥后得到樣品，用制備高效液相色譜繼續分離純化，分析條件如下：ODS-4251-K色譜柱(10×250mm，5μm)；流速，2.8mL/min；柱溫，25℃；檢測波長，205nm；等度洗脫液：40min，80％甲醇(0.1％甲酸)；收集14.7min的色譜峰，減壓除去溶劑，即得具有抑制活性的三萜皂苷類化合物。

從野棉花葉中制備的具有食品腐敗酵母菌抑制活性的三萜皂苷類化合物用于食品抗腐敗。

性能測試

1、采用快速原子轟擊質譜測定法(FAB-MS)對Clematoside?S的分子量測試得到了證實，如圖1所示。