[發(fā)明專利]用微生物胞外碳酸酐酶去除碳酸鈣垢的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410298704.1 | 申請日： | 2014-06-27 |
| 公開（公告）號： | CN104071890A | 公開（公告）日： | 2014-10-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 葉姜瑜;李大榮;石玉竹 | 申請（專利權(quán)）人： | 重慶大學(xué);重慶融極環(huán)保工程有限公司 |
| 主分類號： | C02F3/00 | 分類號： | C02F3/00;C02F5/08 |
| 代理公司： | 重慶華科專利事務(wù)所 50123 | 代理人： | 康海燕 |
| 地址： | 400030 *** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 微生物 碳酸 去除 碳酸鈣 方法 | ||
1.利用微生物胞外碳酸酐酶去除碳酸鈣垢的方法，其特征在于：包括如下步驟：1)制備分泌胞外碳酸酐酶的芽孢桿菌屬細菌菌劑；2)冷凍離心，鹽析粗提取出含碳酸酐酶的粗酶液；3)將粗酶液加入到生了碳酸鹽水垢的工業(yè)循環(huán)水中。?
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1)所述的制備分泌胞外碳酸酐酶的芽孢桿菌屬細菌菌劑包括如下操作：取循環(huán)水系統(tǒng)冷卻水，將其均勻涂布于含有60g/L碳酸鈣、1μmol/L?ZnSO4的牛肉膏蛋白胨瓊脂平板上，將平板置于34～37℃下培養(yǎng)24h，挑出長好的菌落并采用劃線法進行純化；將純化得到的菌種進行16S?rRNA擴增，確定其種屬；將確定后的菌種接種到LB液體培養(yǎng)基中進行擴大培養(yǎng)至穩(wěn)定期，培養(yǎng)溫度為29～31℃，搖床轉(zhuǎn)速為120r/min。?
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：步驟2)的操作具體如下：將1)中培養(yǎng)好的菌液在4℃、5000r/min下離心10min，取上清液，向上清液中加入(NH4)2SO4使溶液飽和度達到70％，置于4℃下鹽析12h后，4℃8000r/min離心30min得到蛋白質(zhì)沉淀，將蛋白質(zhì)沉淀溶解于25mmol/L?pH7.5的Tris-H2SO4緩沖液中，通過G-100葡聚糖凝膠柱，洗脫收集粗酶液。?
4.如權(quán)利要求1～3中任一項所述的方法，其特征在于：在步驟2)中將粗酶液透析48h后用DE-52離子交換柱分離純化，洗脫液為100mmol/L、pH7.5的Tris-H2SO4緩沖液，收集酶活性較高的CA溶液，用聚乙二醇20000濃縮備用。?
5.如權(quán)利要求1～4中任一項所述的方法，其特征在于：步驟1)中分泌胞外碳酸酐酶的芽孢桿菌屬細菌為枯草芽孢桿菌和蠟樣芽胞桿菌。?
6.微生物胞外碳酸酐酶在去除工業(yè)循環(huán)水中碳酸鈣垢的用途。?
7.權(quán)利要求1～5任一項所述的方法在去除工業(yè)循環(huán)水中碳酸鈣垢的用途。?
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