[發明專利]一種火力楠的組織培養快繁方法

無效

• 申請號: 201410297285.X
• 申請日: 2014-06-28
• 公開（公告）號: CN104082139A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 梁鈞淞;甘耀坤;莫昭展;吳鳳娟;梁林英;梁曉菊;潘潔明;嚴翠瓊;張燕飛
• 申請（專利權）人: 玉林師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所 45109
• 代理人: 吳安儀

1.一種火力楠的組織培養快繁方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）不定芽的誘導培養：選取火力楠的嫩莖或頂芽作為外植體,經消毒后接種到誘導培養基上,先在25～28℃條件下全暗培養15～20天，然后置于每天光照10～12小時，光照強度為1000～1500lx，培養溫度為25～28℃條件下培養，直至誘導形成不定芽；所述的誘導培養基以1/2MS為基本培養基，配加2.0%～3.5%蔗糖、0.35%～0.5%瓊脂、0.05%～0.1%活性炭、0.03%～0.1%蛋白胨、50～100ml/L椰子汁以及0.8～1.2mg/L?6-BA和0.3～0.5mg/L?NAA，pH值為5.4～5.8;

（2）叢生芽繼代培養：將不定芽轉入繼代培養基上進行增殖培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養5～7天，然后置于每天光照10～12小時，光照強度為1000～1500lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養，35～45天轉接一次；所述的繼代培養基以MS為基本培養基，配加1.5%～2.5%蔗糖、0.35%～0.5%瓊脂、0.05%～0.1%活性炭以及0.4～0.8mg/L?6-BA、0.1～0.3mg/L?IBA和0.1～0.4mg/L?NAA，pH值為5.4～5.8；

（3）生根培養：將高度約為3～5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種后先在25～28℃條件下全暗培養5～7天，然后置于每天光照10～12小時，光照強度為2000～2500lx，培養溫度為25～28℃的條件下培養至生根，所述的生根培養基以SH為基本培養基，配加1.0%～1.5%蔗糖、0.35%～0.45%瓊脂、0.05%～0.1%活性炭、30～50ml/L椰子汁以及0.3～0.6mg/L?IBA和0.1～0.3mg/L?NAA，pH值為5.4～5.8；

（4）煉苗移栽：試管苗生根后將培養瓶轉至溫室培養30～45天以壯苗，將具有根、莖、葉和芽的完整火力楠試管苗的培養瓶瓶蓋打開并置于自然光照下煉苗5～7天后，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土和河沙混合成的基質中并定植于大田中。

2.根據權利要求1所述的一種火力楠的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（1）所述的外植體為火力楠種子的月齡苗和1～2年生苗的帶節嫩莖或頂芽。

3.根據權利要求1所述的一種火力楠的組織培養快繁方法，其特征在于步驟（1）所述的外植體消毒方法是將火力楠種子的月齡苗和1～2年生苗的帶節嫩莖或頂芽浸泡于75%～80%的酒精溶液中10～30秒鐘，用無菌水沖洗2～5次后置于添加有0.1%～0.15%吐溫的0.1%升汞溶液中8～15分鐘，經無菌水沖洗2～5次后備用。