[發(fā)明專利]一種猴頭菌細(xì)胞壁多糖及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410293175.6
• 申請(qǐng)日: 2014-06-25
• 公開（公告）號(hào): CN104059160A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊焱;唐川;吳迪;劉艷芳;張勁松;顏夢(mèng)秋;唐傳紅;唐慶九;周帥;張忠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 劉懿

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食藥用真菌提取領(lǐng)域，具體的說(shuō)是涉及一種猴頭菌細(xì)胞壁多糖及其制備方法

背景技術(shù)

猴頭菌(Hericium erinaceus)，在分類學(xué)上隸屬于菌物界，擔(dān)子菌門，擔(dān)子菌綱，猴菇目，猴菇科，猴菇屬，又名猴頭蘑、熊頭菇、刺猬菌，肉嫩味美，營(yíng)養(yǎng)豐富，是著名的藥食兩用菌，國(guó)內(nèi)已經(jīng)廣泛用于醫(yī)治消化不良、胃潰瘍、食道癌、胃癌、十二指腸癌、賁門癌等消化系統(tǒng)的疾病。猴頭多糖是猴頭菌的主要有效成分，研究表明猴頭多糖具有抗腫瘤、提高免疫力、降血糖、抗突變、抗衰老等功效。

目前針對(duì)猴頭菌多糖的研究和利用主要是針對(duì)水提胞內(nèi)多糖，其相關(guān)的制備工藝已有很多報(bào)道，但對(duì)于細(xì)胞壁多糖的提取還沒有系統(tǒng)全面的報(bào)道。值得說(shuō)明的是，常規(guī)水提多糖后的猴頭菌子實(shí)體殘?jiān)糠浅？捎^，含有豐富的細(xì)胞壁多糖且它主要是由幾丁質(zhì)和葡聚糖組成，這部分多糖通常沒有繼續(xù)提取利用而被丟棄。真菌細(xì)胞壁多糖通常是β構(gòu)型的葡聚糖，而且多以β-1,3、β-1,6方式連接，這部分葡聚糖具有很強(qiáng)的免疫活性。我們研究也發(fā)現(xiàn)猴頭菌細(xì)胞壁多糖是以β構(gòu)型的葡聚糖為主要成分，對(duì)其開發(fā)利用將有利于充分發(fā)揮猴頭菌多糖的功效作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種猴頭菌細(xì)胞壁多糖的制備方法，該方法包括如下步驟：

①胞內(nèi)多糖的去除：將猴頭菌加入10-20倍重量的水，常溫浸泡30-60min，加熱至沸騰，保持60-120min，過(guò)濾，收集殘?jiān)?；

②粉碎水提：將殘?jiān)?粉碎，加入10-20倍重量的水，常溫浸泡30-60min，沸水提取，離心，分別收集上清液和殘?jiān)?；

③堿提：將殘?jiān)?，按料液比1:10-1:20(w/v)加入0.1-1M的NaOH溶液，4-10℃浸提2-4h，離心，收集提取液；

④醇沉：對(duì)步驟②中收集的上清液和步驟③中收集的提取液進(jìn)行醇沉，離心收集沉淀，即為猴頭菌細(xì)胞壁多糖。

其中步驟④中，對(duì)步驟②中收集的上清液和步驟③中收集的提取液進(jìn)行醇沉，可以分別進(jìn)行，得到的沉淀再合并；也可以先將上清液和提取液合并后再醇沉，最后收集沉淀。

其中步驟②中收集的上清液進(jìn)行醇沉后，得到的沉淀為水溶性猴頭菌細(xì)胞壁多糖；對(duì)步驟③中收集的提取液進(jìn)行醇沉后，得到的沉淀為堿溶性猴頭菌細(xì)胞壁多糖。

本發(fā)明還提供了一種由上述方法制備得到的猴頭菌細(xì)胞壁多糖，其包括水溶性細(xì)胞壁多糖和堿溶性細(xì)胞壁多糖。

本發(fā)明采用殘?jiān)鬯樗岷退岷笤賶A提的方法制備猴頭菌細(xì)胞壁多糖，得到的細(xì)胞壁多糖顏色淺、得率高，達(dá)到9.7％，多糖含量在50％以上。該發(fā)明能充分提取猴頭菌子實(shí)體中的細(xì)胞壁多糖，提高了猴頭菌子實(shí)體原料的利用率，且制備的猴頭菌細(xì)胞壁多糖能夠顯著刺激巨噬細(xì)胞釋放NO，從而增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤能力。

具體實(shí)施方式

制備猴頭菌水溶性細(xì)胞壁多糖：

①胞內(nèi)多糖的去除：將猴頭菌子實(shí)體加入10-20倍重量的水，常溫浸泡30-60min，加熱至沸騰，保持60-120min，過(guò)濾，殘?jiān)貜?fù)上述步驟，至濾液通過(guò)苯酚-硫酸法檢測(cè)不到多糖為止，40-60℃烘干殘?jiān)?/p>

②粉碎水提：將上述殘?jiān)鬯?-20min(粉碎粒度200-300目)，加入10-20倍重量的水，常溫浸泡30-60min，加熱至沸騰，保持60-120min，9803g離心15min，殘?jiān)貜?fù)上述步驟，再提取1-2次，收集上清液和殘?jiān)?/p>

③醇沉：上清液濃縮至料液比(w/v)為1:4-1:6，然后添加入無(wú)水乙醇，至乙醇終濃度達(dá)到60％-80％，4℃靜置8-12h，離心收集沉淀，用70％-90％的乙醇洗滌沉淀2-3次；

④干燥：沉淀加水溶解，揮干乙醇后冷凍干燥即獲得所需的水溶性胞壁多糖；

制備堿溶性細(xì)胞壁多糖：

將上述制備猴頭菌水溶性細(xì)胞壁多糖步驟②中收集的殘?jiān)?0-60℃烘干，按料液比1:10-1:20(w/v)加入0.1-1M的NaOH溶液，4-10℃浸提2-4h，高速離心，殘?jiān)貜?fù)上述步驟，再提取1-2次，合并提取液；

提取液通過(guò)3-6M的HCl調(diào)PH7.0，高速離心，濃縮至料液比(w/v)為1:4-1:6，向該濃縮液中加入無(wú)水乙醇，至乙醇終濃度達(dá)到60％-80％，4℃靜置8-12h，離心收集沉淀，用70％-90％的乙醇洗滌沉淀2-3次；

沉淀加水溶解，揮干乙醇后冷凍干燥即獲得所需的堿溶性細(xì)胞壁多糖。

合并水溶性細(xì)胞壁多糖和堿溶性細(xì)胞壁多糖，即得到所需的猴頭菌細(xì)胞壁多糖。

實(shí)施例1：