[發(fā)明專利]一種鑒定或輔助鑒定待測(cè)擬南芥是否為雄性不育株系的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410291448.3
• 申請(qǐng)日: 2014-06-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104046694A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林金星;王菁;林森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院植物研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C07K14/415;C12N15/29;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種鑒定或輔助鑒定待測(cè)擬南芥是否為雄性不育株系的方法，包括如下步驟：檢測(cè)待測(cè)擬南芥中ACT8基因核苷酸序列第982位核苷酸，若第982位核苷酸為G，則待測(cè)擬南芥為或候選為雄性可育株系，若第982位核苷酸為A，則待測(cè)擬南芥為或候選為雄性不育株系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述檢測(cè)待測(cè)擬南芥中ACT8基因核苷酸序列的方法包括如下步驟：以所述待測(cè)擬南芥的基因組作為模板，用由序列5所示的單鏈DNA分子和序列表中序列6所示的單鏈DNA分子組成的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，測(cè)序PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。

3.一種鑒定或輔助鑒定待測(cè)擬南芥是否為雄性不育株系的試劑盒，包括比對(duì)卡，所述比對(duì)卡上記載ACT8基因野生型序列和ACT8基因突變型序列；

所述ACT8基因野生型序列為序列表中序列3；

所述ACT8基因突變型序列為序列表中序列1。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括引物對(duì)，所述引物對(duì)為由序列5所示的單鏈DNA分子和序列表中序列6所示的單鏈DNA分子組成的引物對(duì)。

5.權(quán)利要求3或4所述的試劑盒在鑒定或輔助鑒定待測(cè)擬南芥是否為雄性不育株系中的應(yīng)用。

6.一種蛋白，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(b)將序列表中序列2所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能由序列2衍生的蛋白質(zhì)。

7.編碼權(quán)利要求6所述蛋白的DNA分子，其是如下(1)-(3)中任一種的DNA分子：

(1)編碼區(qū)為序列表中的序列1所示的DNA分子；

(2)在嚴(yán)格條件下與(1)限定的DNA序列雜交且編碼且具有相同功能的蛋白的DNA分子；

(3)與(1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且編碼具有相同功能蛋白的DNA分子。

8.含有權(quán)利要求7所述DNA分子的重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌；或擴(kuò)增權(quán)利要求7所述DNA分子全長(zhǎng)或其任意片段的引物對(duì)。

9.權(quán)利要求1所述蛋白、權(quán)利要求2或3所述DNA分子或權(quán)利要求4所述重組載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌在鑒定或輔助鑒定待測(cè)擬南芥是否為雄性不育株系中的應(yīng)用。

10.一種培育雄性不育擬南芥的方法，包括如下步驟：使野生型擬南芥的基因組中ACT8基因的第982位核苷酸由G變?yōu)锳，基因組其它序列不變，獲得雄性不育擬南芥。