[發明專利]一種耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法

在審

• 申請號: 201410290119.7
• 申請日: 2014-06-24
• 公開（公告）號: CN105219761A
• 公開（公告）日: 2016-01-06
• 發明（設計）人: 吳堅
• 申請（專利權）人: 上海冠生園天廚調味品有限公司
• 主分類號: C12N15/03
• 分類號: C12N15/03;C12N15/01;C12N13/00;C12N1/21;C12R1/15;C12R1/13
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 胡美強

1.一種耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：其包括如下步驟：

(1)采用傳統菌種選育技術對原始出發菌株的原生質體進行誘變處理，篩選得到耐溫性增強且谷氨酸產酸能力提升的正突變株；

(2)采用濃度為1～2g/L的溶菌酶對菌株酶解3～5h，得到谷氨酸生產菌原生質體；

(3)采用UV照射25～30min，55～60℃加熱滅活谷氨酸生產菌原生質體；

(4)采用濃度為35wt％聚乙二醇6000誘導谷氨酸生產菌原生質體融合25～35min；

(5)通過對原始出發菌株多母本原生質體遞進融合，結合發酵穩定性測試選育得到耐溫型谷氨酸生產菌。

2.如權利要求1所述的耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：所述的原始出發菌株為谷氨酸棒桿菌和/或黃色短桿菌。

3.如權利要求1所述的耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：所述的誘變處理采用下述步驟：對處于對數生長中前期、菌齡為4～6h的菌體進行UV照射5～10min，濃度為1.0～2.0％的硫酸二乙酯處理20～40min，X射線照射25～45min為誘變方法進行原生質體誘變，所述的百分比為體積百分比。

4.如權利要求1所述的耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：所述的篩選為耐42℃高溫篩選、顯色平板篩選和38℃高溫搖瓶篩選。

5.如權利要求1所述的耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：所述的正突變株為耐溫性增強且在38℃溫度下谷氨酸產量有相對提高的菌株。

6.如權利要求1所述的耐溫型產谷氨酸菌株的選育方法，其特征在于：所述的聚乙二醇6000誘導谷氨酸生產菌原生質體融合的時間為25～35min。

7.一種由權利要求1～6中任意一項所述的選育方法得到的耐溫型產谷氨酸菌株。

8.如權利要求7所述的耐溫型產谷氨酸菌株，其特征在于：所述的耐溫型谷氨酸生產菌的最適發酵溫度為36～41℃，初始谷氨酸的平均產量>50g/L。