[發(fā)明專利]適用于多種溫度長期馴化及保存抗砷浸礦菌群的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410286277.5
• 申請日: 2014-06-20
• 公開（公告）號: CN104293727A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設計）人: 張國華;丁建南;王東升;計少石;何力;胡淼;黃江麗;張志紅
• 申請（專利權）人: 江西省科學院生物資源研究所
• 主分類號: C12N1/36
• 分類號: C12N1/36;C12N1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

適用于多種溫度長期馴化及保存抗砷浸礦菌群的方法涉及生物冶金技術領域，尤其涉及一種抗砷浸礦菌群馴化培養(yǎng)及連續(xù)保存的方法。

背景技術

含砷有價金屬礦是一類重要的難利用礦產資源，微生物預氧化能夠有效除砷。在工業(yè)生產中浸礦微生物預處理含砷礦時對砷含量有一定的要求，大多在2％～10％之間，而對含砷量超過10％的原礦或再選礦，過量砷會對浸礦菌造成毒害，致使預氧化效果不好。提高微生物對砷的耐受能力是工業(yè)生產中預處理含砷礦物的研究重點。國內外研究及生產實踐表明，相對于單一抗砷菌，混合抗砷菌可大大提高菌群的抗砷能力，改善微生物預氧化效果，但混合抗砷菌群的保存與抗砷活性的維持一直是研究和生產中的重要技術難點。

發(fā)明內容

針對上述技術難點，本發(fā)明提供了一種操作簡單、能耗低，適應長期馴化及連續(xù)保存抗砷浸礦菌群的方法。

為達到以上目的，本發(fā)明所采用的技術方案是：取一支1000mL玻璃材質的培養(yǎng)罐，在玻璃培養(yǎng)罐中加入罐體四分子三體積的9K溶液，按5％礦漿濃度加入-200目含砷硫化礦粉，將溶液pH用硫酸溶液調至2.0左右，按20％接種量加入浸礦菌液，塞上橡膠塞。橡膠塞中央和邊緣鉆有兩個孔，在中央孔中插入一根長玻璃管，長玻璃管底端距玻璃罐底部約10cm左右，在邊緣孔中插入一短玻璃管，玻璃管底端通過橡膠孔底1cm左右。將軟導氣管一端穿過橡膠塞中央的長玻璃管，并連接一小玻璃漏斗，玻璃漏斗底部距離培養(yǎng)罐底部1cm左右。導氣管另一端連接空氣充氣泵，充氣泵接通電源往浸礦菌培養(yǎng)液中鼓入空氣，帶動溶液及礦粉攪動，玻璃漏斗有利于均勻布氣，并不易聚集浮起的礦泥，從而防止礦泥堵塞導氣管。將組裝好的浸礦菌群培養(yǎng)罐放置于恒溫培養(yǎng)箱中，空氣充氣泵放置于培養(yǎng)箱外部，用橡皮筋輕扣上培養(yǎng)箱門，以不壓迫導氣管為準。培養(yǎng)箱連接外部電源，設定馴化培養(yǎng)溫度，即可進行抗砷浸礦菌群的馴化培養(yǎng)操作。隨著馴化時間的推移，逐漸加入砷含量逐漸增大的硫化礦物，逐步馴化提高浸礦菌群的抗砷能力。

本發(fā)明的優(yōu)點是：操作簡單，能耗低，對科學儀器的損耗小，適應長時間操作。利用本方法經過長期馴化培養(yǎng)能夠獲得及連續(xù)保存抗高砷的浸礦菌群。同時，通過改變裝置中培養(yǎng)箱的溫度，可以長期馴化培養(yǎng)及連續(xù)保存適應不同溫度的抗砷浸礦菌群。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的裝置結構示意圖。

圖中標號說明：1、恒溫培養(yǎng)箱；2、導氣管；3、電源；4、空氣充氣泵；5、短玻璃管；6、橡膠塞；7、長玻璃管；8、小玻璃漏斗；9、玻璃培養(yǎng)罐。

具體實施方式

以下結合附圖對本發(fā)明具體實施方案進行詳細描述：采集礦山酸性廢水，取一支1000mL玻璃材質的培養(yǎng)罐(9)，在玻璃培養(yǎng)罐(9)中加入罐體四分子三體積的9K溶液(K₂HPO₄0.5g/L；(NH₄)₂SO₄3.0g/L；KCl0.1g/L；MgSO₄·7H₂O0.5g/L；Ca(NO₃)₂)，再按5％礦漿濃度加入粒度為-200目含砷硫化礦粉，將溶液pH用硫酸溶液調至2.0左右，按20％接種量加入礦山廢水，塞上橡膠塞(6)。橡膠塞(6)中央和邊緣鉆有兩個小孔，在橡膠塞(6)中央孔中插入一長玻璃管(7)，長玻璃管(7)底端距離培養(yǎng)罐底部10cm左右。在橡膠塞(6)邊緣孔中插入一短玻璃管(5)，短玻璃管(5)底端通過橡膠(6)孔底1cm左右。將軟導氣管(2)一端通過橡膠塞(6)中央的長玻璃管(7)插入玻璃培養(yǎng)罐(9)中，并在導氣管(2)末端連接一小玻璃漏斗(8)，玻璃漏斗(8)直徑小于橡膠塞(6)直徑，玻璃漏斗(8)底部距離培養(yǎng)罐底部1cm左右。導氣管(2)另一端連接空氣充氣泵(4)，將組裝好的浸礦菌群馴化培養(yǎng)罐(9)放置于恒溫培養(yǎng)箱(1)中，空氣充氣泵(4)的泵體置于培養(yǎng)箱(1)外部，用橡皮筋輕扣上培養(yǎng)箱門，以不壓迫導氣管為準。將空氣充氣泵(4)和恒溫培養(yǎng)箱(1)接通電源(3)，空氣充氣泵(4)往浸礦菌群馴化培養(yǎng)罐(9)中鼓入空氣，帶動溶液及礦粉攪動，玻璃漏斗(8)有利于均勻布氣，并不易聚集浮起的礦泥，從而防止礦泥堵塞導氣管(2)。設定恒溫培養(yǎng)箱(1)溫度，即可進行抗砷混合浸礦菌群的馴化培養(yǎng)操作。隨著馴化時間的延長，培養(yǎng)罐(9)中的溶液會蒸發(fā)，因此，要適時向玻璃培養(yǎng)罐(9)中補充9K溶液，并且取適量菌培養(yǎng)液在顯微鏡下鏡檢，觀察浸礦菌群的生長情況和菌密度。隨著馴化時間的推移，逐漸加入砷含量逐漸增大的硫化礦物，逐步馴化提高浸礦菌群的抗砷能力。此外，通過改變恒溫培養(yǎng)箱(1)的溫度，可以長期馴化培養(yǎng)適應不同溫度的抗砷浸礦菌群。