[發明專利]利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的培養基及培養方法

在審

• 申請號: 201410280628.1
• 申請日: 2014-06-23
• 公開（公告）號: CN104017732A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 王培磊
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的培養基，其特征在于配方如下：?

抗生素廠廢水100毫升，氟硅酸鈉0.5毫克，豬糞浸出液2毫升，鴨糞浸出液1.2毫升，f/2維生素溶液1毫升，f/2微量元素1毫升，硬脂酸鎂1毫克，甲硫氨酸0.2毫克；土壤浸出液1.4毫升，海泥浸出液1.6毫升，L-精氨酸0.5毫克，硝酸銨20毫克，尿素3毫克，氯化銨8毫克，磷酸二氫鉀6毫克，麥飯石粉6毫克，920植物生長刺激素6國際單位，鈦溶液1毫升，酵母浸粉8毫克，脫氧膽酸鈉4毫克，山梨醇10毫克，甘露醇4毫克，羧甲基纖維素鈉2毫克，海藻酸丙二醇酯3毫克，胰蛋白6毫克，過磷酸鈣5毫克，三羥甲基氨基甲烷0.5毫克，天冬氨酸0.4毫克，異亮氨酸0.2毫克，臭氧消毒后的純凈海水1000毫升。?

2.一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的方法，其特征在于具體步驟如下：?

培養容器為20升蒸餾水桶，該桶普通化學實驗室和生物實驗室均有且市場有售，高密度聚乙烯材料制成，無色或白色，有較好的透光性，以利藻類進行光合作用，靠近底部有一水龍頭，水桶頂部右上角有一圓形蓋子，上有旋絲，可旋轉而密封，蓋子打上2個孔，一個孔插入充氣管，另一個孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內徑6毫米，將蒸餾水桶洗刷干凈，后用蒸餾水潤洗3遍，裝入權利要求1所述的培養基12升，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無污染的扁圓卵形藻接種，接種密度6×10⁴cell/mL，蓋子上插入兩根干凈玻璃管，一根較長，35厘米，頂端露出蓋子15厘米，下端通過料管與散氣石連接，用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞)，另一根較短，16厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣，兩根玻璃管同樣粗細，用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定，長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是空氣∶純二氧化碳∶臭氧∶氨氣＝92％∶6％∶1％∶1％，連續充氣，充氣量不宜太大，以藻細胞浮起不下沉即可，室外培養，太陽光照射，最佳溫度25±2℃，最佳光照強度5000-10000Lux，培養的前5天，水桶上方搭建一簡易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強度維持在1500-2800Lux，避免強烈陽光對細胞造成的光傷害，第6天撤掉簾子，較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成，培養至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補充新鮮培養基3升，以彌補蒸發掉的水分，蓋上蓋子，充氣，繼續培養，至第9天，扁圓卵形藻密度增加至450×10⁴cell/mL，停止培養，從底部的水龍頭放出藻液，將培養容器洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進入下一輪培養。?

所述中藥消毒液由以下重量比的物質組成：每100份85％乙醇中加入以下重量份的中藥材：白屈菜20～50份、忍冬藤10～20份、桉樹葉15～25份、梔子5～10份、甘草5～15份，防腐輔料1-3份；中藥消毒液制作方法：將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山梔果切碎，?于60-70℃下烘干，再用中藥材粉碎機分別粉碎至80目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克，忍冬藤60克，桉樹葉葉60克，甘草30克，山梔果30克，防腐輔料6克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85％乙醇，浸泡48小時，200篩絹過濾，將清液靜置沉淀32-36小時，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標簽，置于4℃冰箱備用。?

3.根據權利要求2所述的一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。?

4.根據權利要求2所述的一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓氮氣噴射消毒，消毒5-10分鐘。?

5.根據權利要求2所述的一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘。?

6.根據權利要求2所述的一種利用抗生素廠廢水培養扁圓卵形藻的方法，其特征在于，對選用的所述的反應器，洗刷干凈后分兩個階段消毒，先使用高壓氮氣噴射消毒，消毒2-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進行藻類培養。?