[發明專利]AAV-VEGF誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法

無效

• 申請號: 201410280552.2
• 申請日: 2014-06-23
• 公開（公告）號: CN104107420A
• 公開（公告）日: 2014-10-22
• 發明（設計）人: 梅明;左叢林;馮宇霞
• 申請（專利權）人: 昭衍(蘇州)新藥研究中心有限公司
• 主分類號: A61K38/18
• 分類號: A61K38/18
• 代理公司: 蘇州廣正知識產權代理有限公司 32234
• 代理人: 劉述生

技術領域

本發明涉及醫療技術領域，特別是涉及一種AAV-VEGF誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法。

背景技術

視網膜新生血管性疾病指由于新生血管生長伴隨出血、滲出、增生等病理性改變造成的致盲性玻璃體視網膜疾病，是我國乃至世界范圍最嚴重致盲性眼病之一，包括糖尿病性視網膜病變、視網膜血管阻塞性疾病、視網膜靜脈周圍炎、早產兒視網膜病變等，對我國人群視力健康的威脅日益凸顯。一直以來，關于視網膜新生血管發生的機制眾說紛紜，例如血管活性因子及內源性血管生成抑制劑在視網膜新生血管中的作用，它們在眼內不是單一、獨立地起作用，而是多種因子相互協調?,?共同調控血管生成。此外，免疫學途徑近年來逐漸引起科學家重視。其中，炎癥及補體途徑的參與已在部分視網膜新生血管性疾病中得到證實，但至于具體過程及涉及的補體成分均尚無定論。為此，開展視網膜新生血管性疾病相關免疫學機理的研究，以期尋找可以更早、更有效阻斷?RNV?進程的作用靶點，具有重要的臨床意義。

發明內容

本發明主要解決的技術問題是提供一種AAV-VEGF誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法，該方法可以長期保持、成功率高。

為解決上述技術問題，本發明采用的一個技術方案是：提供一種AAV-VEGF誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法，將腺相關病毒轉導的血管內皮生長因子以視網膜下腔注射的方法施于動物體。

在本發明一個較佳實施例中，在視網膜下腔注射所述腺相關病毒轉導的血管內皮生長因子時，用力刺穿Bruch’s膜得到模擬濕性老年性黃斑病變的視網膜病變。

在本發明一個較佳實施例中，在視網膜下腔注射所述腺相關病毒轉導的血管內皮生長因子得到模擬糖尿病眼底病變的視網膜病變。

在本發明一個較佳實施例中，所述方法為在暴露鞏膜的情況下用針頭造口，將裝有所述腺相關病毒轉導的血管內皮生長因子的注射針沿造口處探如玻璃體腔，在視網膜上選擇多處位置進行多點視網膜下腔注射。

本發明的有益效果是：本發明的AAV-VEGF誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法，采用視網膜下腔注射AAV病毒轉導的VEGF基因促成視網膜新生血管增生，同時AAV-VEGF誘導的可以長期保持，成功率達到98%以上，能得到模擬糖尿病眼底病變或濕性老年性黃斑病變的視網膜病變。

具體實施方式

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅是本發明的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例，都屬于本發明保護的范圍。

提供一種腺相關病毒轉導的血管內皮生長因子（AAV-VEGF）誘導視網膜、脈絡膜新生血管的方法，具體操作過程為：

在動物結膜囊內滴散瞳劑復方托吡卡胺滴眼液直至瞳孔完全散大。用氯胺酮按（10mg/kg）肌肉注射，待動物安靜后用戊巴比妥鈉（20mg/kg）后肢靜脈注射麻醉，直至角膜反射和疼痛反射消失。消毒眶周皮膚，1：20稀釋的安爾碘粘膜消毒劑沖洗結膜囊，開瞼器開瞼。選擇右眼顳上角鞏膜緣后2mm為進針處，在眼科手術顯微鏡目視引導下，局限性剪開該處結膜，暴露鞏膜。用直徑為0.45mm針頭造口，將裝有AAV-VEGF病毒液體的注射針的30G平頭針沿造口處探如玻璃體腔，在角膜上放置全視網膜鏡，調至眼底清晰，選擇多處位置進行多點視網膜下腔注射。拔針后觀察切口閉合，必要時8/0縫線縫合鞏膜切口，6/0可吸收縫線縫合結膜囊，涂抗生素眼膏或滴抗生素眼液，包眼，術畢。

本發明采用視網膜下腔注射AAV病毒轉導的VEGF基因促成視網膜新生血管增生，同時AAV-VEGF誘導的可以長期（＞1年）保持。視網膜下腔注射AAV-VEGF基因成功率達到98%以上。視網膜下腔注射AAV-VEGF，新生血管多為視網膜新生血管，可以模擬糖尿病眼底病變；若在視網膜下腔注射時稍用力刺穿Bruch’s膜，脈絡膜新生血管沿該處長入，可以模擬濕性老年性黃斑病變（AMD）的視網膜病變。

以上所述僅為本發明的實施例，并非因此限制本發明的專利范圍，凡是利用本發明說明書內容所作的等效結構或等效流程變換，或直接或間接運用在其它相關的技術領域，均同理包括在本發明的專利保護范圍內。