[發明專利]一種檢測磺胺類藥物的試劑板的制備方法

無效

• 申請號: 201410279130.3
• 申請日: 2014-06-21
• 公開（公告）號: CN104034885A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 李永鋒;陳國勇;傅汝毅;陶玲云;藍文苑
• 申請（專利權）人: 廣西博士海意信息科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 李珊

技術領域

本發明涉及一種檢測蜂蜜中磺胺類藥物殘留的試劑板的制備方法，具體涉及一種檢測磺胺類藥物的免疫膠體金快速檢測試劑板的制備方法。

背景技術

磺胺類藥物適用于治療溶血性鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等感染疾病，用作飼料添加劑，可防治葡萄球菌及溶血性鏈球菌等的感染。由于其藥效持久顯著，在蜜蜂飼養中常用磺胺類藥物進行疾病防治。然而不合理使用，易使磺胺類藥物在蜂蜜等農產品中殘留，藥物通過食物鏈進入人體后會導致血尿、結晶尿、腎臟損害等疾病，對人體健康造成危害，同時磺胺類藥物在蜂蜜中的殘留也給蜂蜜貿易造成障礙。許多國家都規定了磺胺類藥物及磺胺類藥物在蜂蜜中的最高殘留限量(MRL)。我國及歐盟均規定動物性食品中總磺胺以及單個磺胺藥物的MRL為100ppb。

目前，對于磺胺類藥物殘留的檢測方法主要有理化分析法和免疫分析法。理化分析法，如HPLC及LC-MS，具有特異性好、準確率高的特點，是各大檢測機構對檢測樣本進行確證的首選方法，但存在對設備、環境、操作技能等要求，所需費用高，不利于大規模樣本篩選，因而不適合廣大基層部門。免疫分析法，如酶聯免疫吸附法(ELISA)，具有檢測量大，操作相對簡單等優點，越來越多地被用于動物性食品中抗生素殘留的檢測，但是ELISA法整個操作時間仍需要1-2h，且需用到昂貴的特殊儀器設備酶標儀，具有一定局限性。

發明內容

食品安全關系國計民生，研制開發一種檢測限符合要求，重現性好，檢測時間短，適合現場快速檢測，技術產品或儀器設備成本較低，運行費用低的快速檢測試劑迫在眉睫。

針對上述問題，本發明提供了一種磺胺類藥物金標檢測試紙盒及其制備方法，該檢測試紙盒檢測快速、準確、明顯、靈敏度高，為此，本發明還提供了該測試紙盒的制備方法。

一種磺胺類藥物金標檢測試紙盒，其包括試紙條，所述試紙條被封裝于盒殼體，所述盒殼體上面開有注樣孔，觀測孔，其特征在于：所述試紙條用聚氯乙烯或聚乙烯作背襯，在試紙條一端的注樣區粘貼吸附含有膠體金-抗磺胺類藥物單克隆抗體結合物的玻璃纖維膜；在試紙條中間的測試區粘貼硝酸纖維素膜，玻璃纖維膜的一小段重疊在硝酸纖維素膜上，在試紙條另一端吸水區粘貼吸水紙；在硝酸纖維素膜上從注樣區到吸水區的方向，依次設置有材質為對氨基苯磺酰胺基苯甲酸-載體蛋白的檢測線，和材質為羊抗兔IgG質控線，所述硝酸纖維素膜上覆蓋有濃度為1％牛血清白蛋白層；所述注樣孔對應于所述試紙條注樣區的玻璃纖維膜，所述觀測孔對應于試紙條的測試區。

一種磺胺類藥物金標檢測試紙盒的制備方法，包括在試劑板的硝酸纖維素膜上的膠體金結合墊上包被有抗磺胺類藥物多克隆抗體-膠體金標記物，從樣品墊到吸水墊方向上依次噴有檢測線和質控線，分別包被對氨基苯磺酰胺基苯甲酸-載體蛋白偶聯物和羊抗兔IgG。

膠金結合墊上包被有抗磺胺類藥物多克隆抗體與膠體金結合物，膠體金顆粒的平均大小為30nm。

偶聯對氨基苯磺酰胺基苯甲酸的載體蛋白選自牛血清蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白中一種。

一種磺胺類藥物金標檢測試紙盒的制備方法，其工藝流程包括以下步驟：

制備對氨基苯磺酰胺基苯甲酸-BSA偶聯物、制備抗磺胺類藥物多克隆抗體、制備膠體金溶液、制備膠體金標記抗氨基苯磺酰胺基苯甲酸多克隆抗體和組裝抗氨基苯磺酰胺基苯甲酸免疫膠體金快速檢測試劑板。

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采用本發明中的測試紙盒檢測水產類肉食品中磺胺類藥物的含量，檢測時只需將檢測樣品滴入注樣孔中，稍許，即可在觀測區中觀察檢測線和質控線?的變色情況，確定樣品中磺胺類藥物含量是否超標，與現有測試方法相比，?不需要大型檢測儀器，檢測快速、準確、明顯、靈敏度高。

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附圖說明

圖1磺胺類藥物金標檢測試紙盒檢測示意圖；

圖2磺胺類藥物金標檢測試紙條結構圖。

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具體實施方式