[發(fā)明專利]猴頭菌絲體標準特征圖譜的構建方法及基于標準特征圖譜的猴頭菌絲體質量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410275434.2
• 申請日: 2014-06-19
• 公開（公告）號: CN104316603A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設計）人: 何述金;周代俊;常耀臺
• 申請（專利權）人: 湖南新匯制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏

1.一種猴頭菌絲體標準特征圖譜的構建方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)參照物溶液的制備：用甲醇將麥角甾醇配制成每1mL含0.02—0.10mg麥角甾醇的參照物溶液；

(2)供試品溶液的制備：用甲醇將猴頭菌絲體供試品配制成每1mL含0.02—0.10g供試品的供試品溶液；

(3)高效液相色譜分析：分別精密吸取等量的參照物溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，記錄35—40min的色譜圖，得猴頭菌絲體特征圖譜；

其中，步驟(3)所述的高效液相色譜分析中，色譜分離柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相A為甲醇，流動相B為質量百分比濃度為1％冰乙酸溶液；采用梯度洗脫方式：

時間(min)???????流動相A(％)??????流動相B(％)

0～20???????????90→100??????????10→0

20～35??????????100??????????????0

柱溫為30—40℃；流速為0.8—1.2ml/min；檢測波長為250—260nm，理論板數(shù)按麥角甾醇峰計算≥5000；

對多批次猴頭菌絲體建立特征圖譜，通過分析比較，確定出4個共有特征峰，以與麥角甾醇參照物對應的峰為參照峰，4個特征峰的相對保留時間分別為：0.48、0.81、1.00和1.14，偏差為±10％以內，其中相對保留時間為1.00的峰是與麥角甾醇參照物對應的峰；特征峰相對峰寬為30，閾值為50，最小相對峰面積為1000，最小相對峰高為100；這些共有特征峰構成了猴頭菌絲體的特征，作為猴頭菌絲體的標準特征圖譜。

2.一種猴頭菌絲體的質量檢測方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)參照物溶液的制備：用甲醇將麥角甾醇配制成每1mL含0.02—0.10mg麥角甾醇的參照物溶液；

(2)供試品溶液的制備：用甲醇將猴頭菌絲體供試品配制成每1mL含0.02—0.10g供試品的供試品溶液；

(3)高效液相色譜分析：分別精密吸取等量的參照物溶液和供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，記錄35—40min的色譜圖，即得猴頭菌絲體特征圖譜；

所述高效液相色譜分析中，色譜分離柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相A為甲醇，流動相B為質量百分比濃度為1％冰乙酸溶液；采用梯度洗脫方式：

時間(min???????流動相A(％??????流動相B(％)

0～2???????????90→10??????????10→0

20～3??????????10??????????????0

柱溫為30—40℃；流速為0.8—1.2ml/min；檢測波長為250—260nm，理論板數(shù)按麥角甾醇峰計算≥5000；

(4)將猴頭菌絲體特征圖譜與猴頭菌絲體標準特征圖譜相比對，鑒別猴頭菌絲體有效成分以及判別猴頭菌絲體的真?zhèn)巍?/p>