[發明專利]木犀草素的新用途

在審

• 申請號: 201410270721.4
• 申請日: 2014-06-17
• 公開（公告）號: CN105193782A
• 公開（公告）日: 2015-12-30
• 發明（設計）人: 蘇維恒;姜春來;麻彤輝;孔維;徐琳
• 申請（專利權）人: 吉林大學;長春百克生物科技股份公司
• 主分類號: A61K31/352
• 分類號: A61K31/352;A61P31/14
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

技術領域

本申請涉及木犀草素的新用途，具體地，涉及木犀草素用于制備用于預防和治療手足口病的藥物的用途，尤其是用于制備抗腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型藥物的用途。

背景技術

手足口病是一種常見的兒童傳染病，主要病原是腸道病毒71型(Enterovirus71，簡稱為EV71)和柯薩奇病毒A16型(CoxsackievirusA16，簡稱為CA16)。近年來，手足口病在亞太地區的頻繁爆發已經成為了嚴重的社會健康問題。據統計，我國從2008年至2012年，超過七百萬例的手足口病被報道，并導致了2443例死亡。

目前仍沒有上市的疫苗來預防手足口病。在治療方面，目前臨床常使用阿昔洛韋、更昔洛韋、利巴韋林等常規抗病毒藥物，并結合板藍根、注射用雙黃連、清開靈沖劑等。雖然以上藥物已經用于治療手足口病，但是它們都屬于廣譜的清熱解毒藥物，直接作用機制不明且針對性不強。仍缺乏專門針對EV71/CA16的藥物。

雖然現在已經發現，黃酮類化合物貓眼草黃素(chrysosplenetin)和黃酮類垂葉黃素(penduletin)均表現出抗EV71/CA16活性(對于人橫紋肌肉瘤細胞，貓眼草黃素的IC₅₀(半數抑制濃度)為0.20μM，黃酮類垂葉黃素的IC₅₀為0.37μM)，但是兩者的細胞毒性較大：對于人橫紋肌肉瘤細胞，貓眼草黃素的CC₅₀(細胞存活率為50％時的藥物濃度)為13.9μM，黃酮類垂葉黃素的CC₅₀為74.18μM(Zhuetal.，2011)。仍然需要開發針對EV71/CA16的低細胞毒性藥物。

木犀草素，化學名：3’,4’,5,’7-四羥黃酮，化學式為C₁₅H₁₀O₆，分子量為286.23，其結構式如下：

木犀草素多以糖苷的形式存在于多種植物中，這些植物以全葉青蘭、辣椒、野菊花、金銀花、紫蘇含量較高，具有鎮咳和祛痰作用。研究表明，木犀草素抑制巨噬細胞磷酸化，抑制轉錄因子NF-κB的活性，能夠抑制脂多糖誘導的巨噬細胞產生細胞因子IL-6、TNF-α。木犀草素還能提高IFN-γ，降低特異性的Ig-E，減少嗜酸性粒細胞的浸潤。另外，木犀草素除了抗炎、抗過敏作用以外，還具有抗SARS、抗HIV病毒的特性。但是尚未報道過木犀草素對腸道病毒71型和柯薩奇病毒A16型的抗病毒作用。

發明內容

發明人從400種天然產物單體中篩選獲得了一個黃酮類化合物——木犀草素，并驚訝地發現木犀草素能夠在細胞水平上有效抑制腸道病毒71型和柯薩奇病毒A16型的復制，其對腸道病毒71型和柯薩奇病毒A16型造成的細胞病變效應和空斑效應有抑制作用且對細胞的毒性較低，因此木犀草素可以成為抗手足口病病毒的候選藥物，可以用于預防或治療手足口病，尤其用于對抗腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型病毒。

本發明提供了木犀草素在制備用于預防或治療受試者中的手足口病的藥物中的用途。優選地，所述受試者是人。更優選地，所述受試者為16歲以下的兒童。最優選地，所述受試者為5歲以下的兒童。

優選地，所述預防或治療手足口病的藥物是抗腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型的藥物。

優選地，所述藥物包含活性成分木犀草素和一種或多種可藥用載體。

優選地，所述藥物還可包含其他用于治療手足口病的活性成分。

本發明還提供了一種用木犀草素抑制由腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型引起的細胞病變效應的方法，所述方法包括使濃度為0.1-400μM的木犀草素與細胞接觸。

優選地，木犀草素的濃度為0.39-200μM，更優選地，木犀草素的濃度為6.25-150μM，最優選地，木犀草素的濃度為12.5-100μM。

優選地，所述細胞是人細胞，更優選地，所述細胞是人橫紋肌肉瘤細胞或穩定轉染腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型的受體hSCARB2的人橫紋肌肉瘤細胞。

本發明還提供了一種用木犀草素抑制由腸道病毒71型和/或柯薩奇病毒A16型引起的空斑形成的方法，所述方法包括使濃度為5-400μM的木犀草素與細胞接觸。

優選地，木犀草素的濃度為6.25-100μM，更優選地，木犀草素的濃度為12.5-50μM。