[發(fā)明專利]一種利用高速逆流色譜分離純化制備丹酚酸B和迷迭香酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410270399.5
• 申請日: 2014-06-17
• 公開（公告）號: CN104031013A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李行諾;童勝強;顏繼忠;張文強
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07D307/86
• 分類號: C07D307/86;C07C69/732;C07C67/48
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種利用高速逆流色譜分離純化制備丹酚酸B和迷迭香酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將丹參藥材粉碎成粗粉，加入體積分數(shù)10％-95％的乙醇水溶液中，加熱至回流提取數(shù)次，提取液趁熱過濾，冷卻，濾液減壓除去溶劑，得到乙醇提取物；

(2)丹酚酸B、迷迭香酸的富集：將步驟(1)得到的乙醇提取物加入填充有大孔吸附樹脂的色譜柱中，用水和甲醇或乙醇的混合溶劑梯度洗脫，收集含有丹酚酸B和迷迭香酸的洗脫液，減壓回收溶劑，干燥、得到丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物；

(3)丹酚酸B、迷迭香酸的純化：以體積比為1-5:5-10:1-5:1-10的溶劑A、溶劑B、溶劑C、溶劑D組成高速逆流溶劑體系，將所述高速逆流溶劑體系混合充分后靜置，按上下兩相分開，取上相為固定相，下相為流動相，將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層線圈分離柱，設(shè)定高速逆流色譜儀，在500～1000r/min轉(zhuǎn)速下，以0.5～5ml/min的流速注入流動相，取步驟(2)得到的丹酚酸B和迷迭香酸的混合粗提物，用上相、下相體積比1：1的混合溶劑溶解后進樣，分別收集丹酚酸B的流出液和迷迭香酸的流出液，濃縮、干燥，得到丹酚酸B、迷迭香酸；

所述溶劑A為甲醇、乙醇、正己烷或異己烷，所述溶劑B為乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸正丁酯，所述溶劑C為甲醇、乙醇或丙酮，所述溶劑D為水。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中，乙醇溶劑的體積用量以粗粉的質(zhì)量計為5～20L/kg，每次回流提取的時間為30-60min，提取次數(shù)為1-3次。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(1)中，所述乙醇溶劑為體積分數(shù)50％的乙醇溶劑。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)中，所述大孔吸附樹脂為非極性、弱極性或中極性的大孔吸附樹脂。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于步驟(2)中，所述大孔吸附樹脂為D101、AB-8或HPD300大孔吸附樹脂。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)中，所述梯度洗脫條件為先用2-6倍柱體積的水洗脫，再用2-6倍柱體積的體積分數(shù)10％-30％乙醇或甲醇的水溶液洗脫，再用2-6倍柱體積的體積分數(shù)20％-40％乙醇或甲醇水溶液洗脫，再用2-6倍柱體積的體積分數(shù)30％-50％乙醇或甲醇水溶液洗脫，再用2-6倍柱體積的體積分數(shù)40％-60％乙醇或甲醇水溶液洗脫，再用2-6倍柱體積的體積分數(shù)50％-95％乙醇或甲醇水溶液洗脫。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)中，所述溶劑A為正己烷，所述溶劑B為乙酸乙酯，所述溶劑C為乙醇。

8.如權(quán)利要求1或7所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中，所述溶劑A、溶劑Ｂ、溶劑C的體積比為3:7:1:9。

9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的高速逆流色譜儀中采用波長190-380nm的紫外檢測器檢測，根據(jù)紫外檢測器光譜圖的峰形對流出液進行區(qū)分。

10.如權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于步驟(3)中，所述紫外檢測器的波長為254～300nm。