[發明專利]一種橙黃酮的提取分離方法

在審

• 申請號: 201410266494.8
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104072464A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然植物有效成分提取技術領域，涉及一種橙黃酮的提取分離方法。

背景技術

橙黃酮（Aridanin）是從藜科(Chenopodiaceae)?香藜?Chenopodium?botrys?L.地上部分葉中提取分離得到的一種黃酮類化合物。分子式為C₂₀H₂₀NO₇，分子量為372.37，mp.169-171℃。橙黃酮具有對小鼠髓性白血病細胞有誘導分化活性，濃度為50μM、5μM時，生長率分別為62%和81%(對照100%)，吞噬細胞活性都>10%，濃度為100μM、50μM時，HL-60細胞生長率分別為50%和73%，吞噬細胞活性>25%和>10%；抗腫瘤作用，濃度為30μg/mL時，體外抑制埃氏腹水腫瘤細胞生長，生長抑制率為50%，抑制嗜堿細胞釋放由抗原和TPA誘導的組胺，其IC50分別為44和26μM；抑制人單核細胞中白介素-1誘導的組織因子的表達，IC50為10μM；強的15-脂氧化酶抑制劑，抑制亞油酸氫化，IC50為114μM。

目前，國內尚未發現大量制備橙黃酮的方法報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種橙黃酮的提取分離方法，

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種橙黃酮的提取分離方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取香藜的地上部分粉碎，加生物酶酶解8-10小時，酶解原料加60-80%乙醇溶液微波或超聲提取2-3次，提取液濃縮至浸膏；

（2）將提取浸膏加適量水分散后加入大孔樹脂柱中吸附，先用水洗脫，再用50-70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液；

（3）將洗脫液濃縮后采用制備型液相色譜分離，紫外在線檢測，收集目標成分，低溫干燥即得橙黃酮。

步驟（1）中所述生物酶可選果膠酶、纖維素酶和淀粉酶中的任一種，用量為原料重量的0.2-0.5%。

步驟（2）中所述大孔樹脂可選NK-9、ADS-21和HPD417中的一種。

步驟（3）中所述制備型高效液相色譜中流動相為30-40%的乙腈溶液。

本發明方法制備量大，產品含量高，適合工業化生產

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將香藜的地上部分粉碎，過20目篩，稱取1kg投入提取罐中，稱取2.2g纖維素酶溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃條件下酶解10小時，升溫至80℃滅酶，過濾，將酶解原料加10倍量70%乙醇溶液，在50℃條件下微波提取3次，過濾得到提取液，減壓濃縮至浸膏，加水分散，加入NK-9大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫，再取3BV50%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏。將浸膏用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，乙腈-水（30：70）為流動相，紫外在線檢測，收集高濃度流分，旋轉蒸發濃縮、低溫干燥即得1.1g橙黃酮，含量96.4%。

實施例2：

將香藜的地上部分粉碎，過20目篩，稱取1kg投入提取罐中，稱取2.8g果膠酶溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃條件下酶解8小時，升溫至80℃滅酶，過濾，將酶解原料加6倍量60%乙醇溶液，在50℃條件下超聲提取3次，過濾得到提取液，減壓濃縮至浸膏，加水分散，加入ADS-21大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫，再取4BV60%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏。將浸膏用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，乙腈-水（33:67）為流動相，紫外在線檢測，收集高濃度流分，旋轉蒸發濃縮、低溫干燥即得0.97g橙黃酮，含量98.1%。

實施例3：

將香藜的地上部分粉碎，過20目篩，稱取3kg投入提取罐中，稱取12.6g果膠酶和纖維素復合酶（比例1:2）溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃條件下酶解9小時，升溫至80℃滅酶，過濾，將酶解原料加8倍量75%乙醇溶液，在50℃條件下微波提取2次，過濾得到提取液，減壓濃縮至浸膏，加水分散，加入NK-9大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫，再取3BV70%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏。將浸膏用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，乙腈-水（35:65）為流動相，紫外在線檢測，收集高濃度流分，旋轉蒸發濃縮、低溫干燥即得0.66g橙黃酮，含量97.1%。

實施例4：

將香藜的地上部分粉碎，過20目篩，稱取4kg投入提取罐中，稱取13.6g淀粉酶和果膠酶復合酶（比例1:1）溶解在7LpH4.5的水溶液中加入提取罐，在50℃條件下酶解8.5小時，升溫至80℃滅酶，過濾，將酶解原料加7倍量80%乙醇溶液，在50℃條件下超聲提取2次，過濾得到提取液，減壓濃縮至浸膏，加水分散，加入HPD417大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫，再取5BV65%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮得浸膏。將浸膏用甲醇溶解，注入制備型高效液相色譜儀，乙腈-水（40:60）為流動相，紫外在線檢測，收集高濃度流分，旋轉蒸發濃縮、低溫干燥即得0.78g橙黃酮，含量95.3%。