[發(fā)明專利]一種提取純化紫色瓣蕊豆酚的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410266473.6
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104072469A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D311/64
• 分類號: C07D311/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種提取純化紫色瓣蕊豆酚的方法。

背景技術(shù)

紫色瓣蕊豆酚（Petalopurpurenol），主要存在于豆科(Leguminosae)紫色瓣蕊豆Petalostemon?purpureus?Rydb.根中，是一種黃酮醇類化合物，mp92-95℃，分子式：C₂₅H₂₄O₇，分子量：436.46，結(jié)構(gòu)式：

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現(xiàn)代藥理研究表明，紫色瓣蕊豆酚具有細胞毒活性，對BC1、HT、LU1、Mel-2、KB、KB-V(+VLB)、KB-V(-VLB)、A-431、LNCaP、ZR-75-1、U373細胞株的ED50(μg/mL)依次為9.9、7.3、14.8、17.1、18.9、1.0、6.7、11.9、14.8、4.1和13.3。

經(jīng)文獻檢索，尚無適用于高純度紫色瓣蕊豆酚的提取純化方法報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種適用于規(guī)模化生產(chǎn)、產(chǎn)品純度高的提取純化紫色瓣蕊豆酚的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

（1）以紫色瓣蕊豆根為原料，進行干燥、粉碎，采用超臨界二氧化碳技術(shù)萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂類物質(zhì)；

（2）殘渣加5-10倍（V/W）75-90%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取2-3次，每次1-2h，合并提取液；

（3）提取液濃縮后上大孔樹脂柱，先用水和40-60%乙醇溶液洗脫，再用85-95%乙醇溶液洗脫，收集85-95%乙醇洗脫液；

（4）洗脫液濃縮，上硅膠短粗柱，柱徑高比為1:4-5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液為洗脫劑，收集洗脫液，濃縮，放置結(jié)晶；

（5）分出結(jié)晶，丙酮-正己烷混合溶劑重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，冷凍干燥即得紫色瓣蕊豆酚。

所述步驟（1）中超臨界二氧化碳萃取溫度為35-50℃，壓力為20-32MPg，萃取時間為0.5-1h。

所述步驟（3）中大孔樹脂可選HPD100、ADS-17、D101或HZ801型。

所述步驟（4）中乙酸乙酯-丙酮混合溶液體積比為1:5-15。

所述步驟（5）中丙酮-正己烷混合溶劑體積比為1-1.5:1。

綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點：

（1）采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)脫除油脂類物質(zhì)，快速、高效。

（2）采用超聲循環(huán)提取的方法，提取效率高。

（3）采用大孔樹脂和硅膠短粗柱層析后進行結(jié)晶，，從而獲得含量98%以上的紫色瓣蕊豆酚，成本低，分離效果好。

（4）本發(fā)明所用試劑乙酸乙酯、丙酮等，可替代通常柱層析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。

下面將結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明做進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施例。

具體實施方式

實施例1：

取紫色瓣蕊豆根粗粉500g，采用超臨界二氧化碳技術(shù)萃取紫色瓣蕊豆根中的油脂類物質(zhì)，萃取溫度為35℃，壓力為20MPg，萃取時間為1h，殘渣加10倍（V/W）90%丙酮溶液進行超聲循環(huán)提取2次，每次1h，合并提取液，濃縮后上HPD100型大孔樹脂柱，先用水和40%乙醇溶液洗脫，再用85%乙醇溶液洗脫，收集85%乙醇洗脫液，濃縮，與200目的硅膠按重量比1:1拌勻、陰干，上硅膠短粗柱，柱徑高比為1:5，以乙酸乙酯-丙酮混合溶液為洗脫劑，依次按1:5、1:10、1:15體積比進行洗脫，收集含紫色瓣蕊豆酚的洗脫液，回收試劑，將所得紫色瓣蕊豆酚濃縮液置于結(jié)晶罐中靜置20小時使其結(jié)晶，過濾，分出結(jié)晶，采用丙酮-正己烷（1.5:1）混合溶劑重結(jié)晶，濾出結(jié)晶，冷凍干燥即得紫色瓣蕊豆酚0.32g，純度為97.4%。

實施例2：