[發明專利]一種可食當歸素Ⅴ的制備方法及抗腫瘤應用

在審

• 申請號: 201410266449.2
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104072508A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;A61K31/37;A61K47/36;A61K47/28;A61K47/12;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明公開了一種植物提取物的制備方法及應用，特別涉及一種可食當歸素Ⅴ的制備方法及抗腫瘤應用。

背景技術

可食當歸素Ⅴ（Edulisin?Ⅴ），CAS號158446-39-0，?mp.113.5-115.0℃，分子式C₂₄H₂₈O₇，分子量428.48，結構式為：

?

可食當歸素Ⅴ來源于傘形科(Umbelliferae)?可食當歸?Angelica?edulis?Miyabe的果實。研究表明，可食當歸素Ⅴ具有抗腫瘤促進作用。抑制TPA誘導的32Pi摻入HeLa細胞磷脂中。在50μg/mL時，抑制率100%；10μg/mL時，抑制率83.9%。

發明內容

為滿足臨床需要，擴大用藥品種，更好地治療癌癥，，提供一種可食當歸素Ⅴ的制備方法及抗腫瘤應用。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種可食當歸素Ⅴ的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）取可食當歸果實粉碎20-80目，置于CO₂超臨界萃取罐中萃取，通入液態CO₂，流量為1-5mL/min/g原料，同時通入甲醇溶液做夾帶劑，流量為1-3mL/min/g，原料萃取溫度30-50℃，壓力15-25MPa，萃取時間1-4h，解析得萃取物；

2）上述萃取物用20%-40%乙醇溶液熱溶，加入大孔樹脂柱中吸附，先用5-10倍量40%-60%洗脫，再用5-10倍70%-90%乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，放置結晶；

3）上述結晶物濾出用80%-99%甲醇溶液溶解，加水至醇濃度50%，加入氯仿萃取，萃取液濃縮至1/5-1/20體積冷藏結晶，再用甲醇溶液重結晶即得。

所述步驟2）中的大孔樹脂型號可選AB-8、D101、HZ816、HPD400中的一種。

所述制備的可食當歸素Ⅴ，在其口服配方中添加腸吸收促進劑，包含中鏈脂肪酸鹽、膽酸鹽、鵝去氧膽酸鹽、殼聚糖及其衍生物中的一種或幾種。

采用本法制備可食當歸素Ⅴ，工藝簡便易操作，制備量大，產品得率高，而且低污染；添加腸吸收促進劑，有利于提高生物利用度。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1：

可食當歸素Ⅴ的制備

取可食當歸果實干燥去雜，粉碎40目，稱取10kg，置于CO₂超臨界萃取罐，通入液態CO₂，流量為2mL/min/g原料，同時通入甲醇做夾帶劑，流量為2mL/min/g，原料萃取溫度40℃，壓力22MPa，萃取時間2h，解析萃取物用20%乙醇溶液熱溶，加入AB-8大孔樹脂柱中吸附，先用10倍量40%洗脫，再用7倍80%乙醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，放置結晶。濾出結晶用99%甲醇溶液溶解，加水至醇濃度50%，加入等體積氯仿萃取2次，萃取液濃縮至1/10體積冷藏結晶，再用99%甲醇溶液重結晶，得橙紅色結晶8.5g，經HPLC檢測，含量98.5%。

實施例2：

可食當歸素Ⅴ的抗腫瘤應用

1、材料

動物：昆明種小鼠，雌雄各半性，體重20±2g，由南京中醫藥大學提供。

細胞株：Sarcoma?180腹水型瘤株（S180），由中國科學院上海藥物研究所提供。

2、方法

取50只小鼠，每只小鼠左腋下接種S₁₈₀瘤液，次日隨機分成5組，每組10只，分別為生理鹽水對照組（NS組）、陽性對照組、可食當歸素Ⅴ低劑量組（2mg/kg）、中劑量組（4mg/kg）、高劑量組（8mg/kg）。接種24h后可食當歸素Ⅴ給藥組灌胃給藥，連續7，陽性對照組試驗期間腹腔注射2次，隔日給藥。期間，每日觀察小鼠的一般活動、皮毛、糞便等情況。最后一次給藥24h后斷頸處死，稱重，并計算抑瘤率。

3、結果

本發明植物提取物對小鼠S₁₈₀皮下荷瘤有明顯的抑制作用，抑瘤率為74.32-80.31%，結果見表1。

抑瘤率（%）=（1-治療組平均瘤重/空白對照組平均瘤重）×%

表1??本發明植物提取物對S₁₈₀皮下荷瘤小鼠的抑瘤作用（n=10，±S）