[發明專利]一種提取異別土木香內酯的方法

在審

• 申請號: 201410266368.2
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104072459A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D307/92
• 分類號: C07D307/92
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥化學技術領域，涉及一種一種提取異別土木香內酯的方法。

背景技術

異別土木香內酯（Isoalloalantolactone），分子式為C₁₅H₂₀O₂，分子量為232.32，結構式為

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異別土木香內酯是從菊科(Compositae)?總狀土木香?Inula?racemosa?L.的根中分離得到一種萜類化合物。藥理研究表明，異別土木香內酯具有抗真菌作用，對下列真菌的MIC(μg/mL)分別為：蠕孢≤50、腐霉125、尖鐮孢200；細胞毒活性，對結腸腺癌(HT-20)，人乳腺癌(MCF-7)和人肺癌(A-549)的ED50依次為1.00μg/mL、2.00μg/mL和1.00μg/mL；植物生長調節劑，抑制千穗谷和稗的胚根伸長，其IC50分別為9.73μg/mL和55.75μg/mL，促進金黃菜豆莖切條長根。

現有技術中，制備異別土木香內酯的生產技術很少見。如中國專利“一種異土木香內酯的提純制備方法和其在制備抗腫瘤藥物中的應用”（專利申請號為200810055376.7），公開了一種異土木香內酯的提純制備方法，工藝步驟包括：乙醇浸提、石油醚萃取、硅膠柱層析等，該發明采用傳統工藝方法，有機試劑用量大，不利于環境保護，得率低，周期長。

發明內容

本發明的目的是提供一種提取異別土木香內酯的方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種提取異別土木香內酯的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）以土木香的根為原料，切成段狀，放入高速組織搗碎機，在轉速為18000rpm條件下保持3-5min后，過40目篩備用；

（2）原料按照料液比1:10-15（g/ml）的比例加入乙醇水溶液后，再加入0.3%的纖維素酶，在超聲功率600W、48℃條件下酶解40-60min，得到酶解原料；

（3）將酶解原料投入加入閃式提取器中，進行閃式提取，過濾得到提取液，濃縮干燥得到粗提物；

（4）將所得粗提物用甲醇溶解，干法上樣至高壓硅膠柱層析純化，氯仿-甲醇溶劑系統梯度洗脫，收集異別土木香內酯流分，減壓濃縮；

（5）將濃縮液用超臨界CO₂抗溶劑結晶得到異別土木香內酯結晶。

所述步驟（2）中乙醇水溶液體積百分比為85%。

所述步驟（3）中閃式提取電壓為160V，提取時間為5-10min。

所述步驟（4）中所述高壓硅膠柱層析，硅膠目數為200目，耐壓35MPa，柱內徑為250mm，層析柱徑高比為1：10。

所述步驟（4）中所述氯仿-甲醇的體積比為1:1-1:13。

所述步驟（5）中所述超臨界CO₂抗溶劑結晶條件為：壓力12-25MPa，溫度35-55℃。

本發明的有益效果是：本發明操作簡單，耗時短，得率高，易規模化生產；采用高壓層析柱，上樣量大，生產周期短，分離度好，產品純度高；采用超臨界CO₂抗溶劑結晶，所析晶體純度高，無需噴霧干燥等耗能工序，具有工序簡單、環境污染小、產品品質好等優點。

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下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

以土木香的根為原料，放入高速組織搗碎機，在轉速為18000rpm條件下保持5min后，過40目篩備用，稱取1kg，按照料液比1:10（g/ml）的比例加入85%乙醇水溶液后，再加入0.3%的纖維素酶，在超聲功率600W、48℃條件下酶解50min，得到酶解原料，加入閃式提取器中，提取電壓為160V，提取時間為8min，進行閃式提取，過濾得到提取液，提取液濃縮干燥后得到粗提物，用甲醇溶解，干法上樣至高壓硅膠（硅膠目數為200目）柱層析純化，耐壓35MPa，柱內徑為250mm，層析柱徑高比為1：10，氯仿-甲醇按體積比為1:1、1:5、1:13梯度洗脫，收集異別土木香內酯流分，將流分濃縮至有少量晶體析出，置于超臨界CO₂結晶釜中，控制結晶壓力12MPa，溫度35℃，進行超臨界CO₂抗溶劑結晶，結晶時間為60min，停機后取出結晶產物，含量為93.5%。

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實施例2：