[發明專利]一種勻漿法協同酶解制備薯蕷皂苷元的方法

在審

• 申請號: 201410266301.9
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104073541A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 劉東鋒;楊成東
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C07J71/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然產物有效成分分離領域，具體涉及一種利用勻漿法協同酶解提取薯蕷皂苷元的方法。

背景技術

穿山龍為薯蕷科植物穿山龍薯蕷的干燥根莖，所含的主要成分為薯蕷皂苷。我國薯蕷屬植物資源豐富，有60多種，大多數含有多量薯蕷皂苷。薯蕷皂苷經酸或酶水解后，生成薯蕷皂苷元（俗稱薯蕷皂苷素）和1分子葡萄糖及2分子鼠李糖。薯蕷皂苷元為白色晶體，熔點204~207℃，可溶于常用的有機溶劑如乙醚、石油醚、汽油及醋酸中，不溶于水，是目前合成各種甾體藥物的重要合成原料。

目前關于薯蕷皂苷元的制備方法的專利和文獻較多，包括使用酸水解法、有機溶劑（如石油醚、汽油、己烷、氯仿等）法，超臨界流體萃取法，或超聲提取酸水解法等。然而，傳統的方法需經過多次的萃取濃縮，能耗高，生產周期長，提取率低，同時也對環境造成了嚴重的污染；而超臨界流體萃取法和超聲波提取法效果雖好，但存在設備一次性投入過高的缺點。如專利200410060679.X公布了的方法，其不足之處是仍使用傳統的鹽酸為催化劑，產生大量的酸性有機廢水，無法從根本上解決薯蕷皂苷元生產的污染問題，且得率較低。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種工藝簡單、提取時間短、收率高的制備薯蕷皂苷元的方法。

本發明包括以下步驟：

將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，加入原料5~8倍（重量比）的50~70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理8~10min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3~4%（重量比）的復合酶，醋酸/醋酸鈉調節PH為3.5~4.5，攪拌均勻，于50~60℃酶解1~2h，80℃滅活15min，氫氧化鈉調PH為中性，經離心、濃縮、重結晶得薯蕷皂苷元。本發明所述的生物酶為纖維素酶、半纖維素酶與淀粉酶的復合酶（比例為0.4:0.2:0.4），結晶溶劑為石油醚、甲醇或乙醇。

本發明使用勻漿法提取植物的有效成分，通過機械及液力剪切作用將物料撕裂和粉碎，使物料破碎和有效成分的提取同步進行，達到對植物有效成分快速、強化提取的目的。再結合復合酶（纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶酶）進一步的破壞細胞的細胞壁和細胞質，使其疏松、膨脹、崩潰，從而增大了有效成分的擴散面積，減小了阻力，提高了有效成分的得率。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料5倍（重量比）的50%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理8min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3%（重量比）的復合酶（纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸鈉調節PH為3.5，攪拌均勻，于50℃酶解2h，80℃滅活15min，氫氧化鈉調PH為中性，經離心、濃縮、石油醚重結晶得薯蕷皂苷元1.92g，經檢測，薯蕷皂苷元的收率為1.92%。

實施例2：

將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料7倍（重量比）的70%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理10min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料4%（重量比）的復合酶（纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸鈉調節PH為4.5，攪拌均勻，于55℃酶解1.5h，80℃滅活15min，氫氧化鈉調PH為中性，經離心、濃縮、乙醇重結晶得薯蕷皂苷元2.05g，經檢測，薯蕷皂苷元的收率為2.05%。

實施例3：

將穿山龍除雜切片曬干，烘干粉碎，過100目篩，取100g，加入原料8倍（重量比）的65%的乙醇，使用高速勻漿機，在200W的功率下，對穿山龍粉末進行處理9min，得薯蕷皂苷提取液，再加入原料3.5%（重量比）的復合酶（纖維素酶、半纖維素酶和淀粉酶比例為0.4:0.2:0.4），醋酸/醋酸鈉調節PH為4.0，攪拌均勻，于60℃酶解1h，80℃滅活15min，氫氧化鈉調PH為中性，經離心、濃縮、甲醇重結晶得薯蕷皂苷元1.97?g，經檢測，薯蕷皂苷元的收率為1.97%。