[發(fā)明專利]一種治療消渴病的藥物制劑的檢測方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410264670.4
• 申請(qǐng)日: 2014-06-13
• 公開（公告）號(hào): CN104007205A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘杰;于娟;吳麗璇;陳啟蘭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/90
• 代理公司: 北京三聚陽光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 趙敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥制劑檢測領(lǐng)域，具體涉及一種治療消渴病的藥物制劑的檢測方法。

背景技術(shù)

目前，全球范圍內(nèi)，消渴病(糖尿病)的患者約為2億多，其中85％的患者為老年糖尿病患者，并且發(fā)病率有日益增加的趨勢；我國是世界上的糖尿病患者人數(shù)最多的國家之一，僅次于美國。糖尿病嚴(yán)重威脅著人類的健康甚至生命。

中國專利CN101496829A公開了一種治療消渴病的藥物組合物，該藥物組合物的原料藥主要由蠶沙和甘草組成，處方中的蠶沙具有祛風(fēng)除濕，活血定痛的功效，該藥物組合物具有較好的降血糖的作用，對(duì)治療消渴癥具有較好的療效。該文獻(xiàn)中還公開了通過TLC法檢測β-谷甾醇、HPLC法檢測甘草酸單銨以及HPLC法檢測派可林酸等方法對(duì)該藥物組合物進(jìn)行質(zhì)量控制。

但是，隨著對(duì)該藥物的深入研究，臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，該藥物組合物治療糖尿病的有效物質(zhì)主要是蠶沙中含有的生物堿，具有顯著抑制a-葡萄糖苷酶活性的功效，并且所述生物堿的主要活性成分為1-脫氧野尻霉素。然而現(xiàn)有的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及檢測方法均是僅針對(duì)其中含有的派可林酸進(jìn)行測定，不僅檢測的指標(biāo)較為單一，而且也不利于從整體上對(duì)該藥物的質(zhì)量進(jìn)行有效控制。因此，建立一種可快速、全面、針對(duì)性強(qiáng)的上述藥物組合物的質(zhì)量檢測及質(zhì)量控制的方法具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

為此，本發(fā)明所要解決的是現(xiàn)有的治療消渴病的藥物組合物的檢測方法存在檢測指標(biāo)單一、不利于對(duì)該藥物的質(zhì)量進(jìn)行有效控制的問題，從而提出一種可快速、全面、針對(duì)性的對(duì)所述治療消渴癥的藥物組合物進(jìn)行檢測的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明的一種治療消渴病的藥物制劑的檢測方法，所述藥物制劑的原料藥組成為：蠶沙6000-8000重量份以及甘草100-200重量份；

該檢測方法包括如下對(duì)1-脫氧野尻霉素的含量測定步驟：

精密稱定1-脫氧野尻霉素對(duì)照品5-15mg，加水稀釋制成每mL含0.1-0.5mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液；精密量取1mL所述對(duì)照品儲(chǔ)備液，并精密加入質(zhì)量濃度為1-3％的NaHCO₃溶液1-4mL以及1-3mg/mL的芴甲氧羰酰氯乙腈溶液1-4mL，混勻并于30-60℃進(jìn)行水浴反應(yīng)20-40min，隨后以30-60％的乙腈定容至20-30mL，作為對(duì)照品溶液；

取待測藥物制劑研細(xì)，并精密稱取0.5-2.0g，加入用濃鹽酸調(diào)pH值為3-4的水30-60mL，攪拌均勻，超聲處理20-30min，并離心取上清液；殘?jiān)觩H值為3-4的水適量洗滌，離心合并上清液，并濃縮至10-20mL；將濃縮液置于陽離子交換樹脂柱，先用水洗脫，收集并棄去水洗脫液，再用0.5M氨水洗脫，并收集氨水洗脫液，濃縮至近干，隨后加水10mL溶解，超聲處理1-5分鐘，并加水定容至20-30mL，得到供試品儲(chǔ)備液；精密量取1mL所述供試品儲(chǔ)備液，依次加入質(zhì)量濃度為1-3％的NaHCO₃溶液1mL、以及1-3mg/mL的芴甲氧羰酰氯乙腈溶液4mL，混勻并于30℃進(jìn)行水浴反應(yīng)40min，隨后以30-60％的乙腈定容至20-30mL，作為供試品溶液；

照高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙睛為流動(dòng)相A、以0.2％的磷酸溶液為流動(dòng)相B按照如下程序進(jìn)行梯度洗脫：0-8min，A：B為25％：75％；8-40min，A：B為25％：75％→50％：50％；40-45min，A：B為50％：50％；45-46min，A：B為50％：50％→25％：75％；46-75min，A：B為25％：75％；控制流速1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長263nm，理論板數(shù)按1-脫氧野尻霉素峰計(jì)算應(yīng)不低于6000；

精密吸取所述對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定。

本發(fā)明上述治療消渴病的藥物制劑的檢測方法，所述對(duì)1-脫氧野尻霉素的含量進(jìn)行測定步驟包括：

精密稱定1-脫氧野尻霉素對(duì)照品10mg，加水稀釋制成每mL含0.2mg的對(duì)照品儲(chǔ)備液；精密量取1mL所述對(duì)照品儲(chǔ)備液，并精密加入質(zhì)量濃度為2％的NaHCO₃溶液2mL以及2mg/mL的芴甲氧羰酰氯乙腈溶液2mL，混勻并于50℃進(jìn)行水浴反應(yīng)40min，隨后以30％的乙腈定容至25mL，作為對(duì)照品溶液；