[發(fā)明專利]一種船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410263995.0 | 申請日: | 2014-06-13 |
| 公開(公告)號: | CN104004705A | 公開(公告)日: | 2014-08-27 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 黃強(qiáng) | 申請(專利權(quán))人: | 山東恒誠檢測科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/07 | 分類號: | C12N5/07 |
| 代理公司: | 北京雙收知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11241 | 代理人: | 盧新 |
| 地址: | 261400 山東省煙臺市*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 船舶 壓載艙 沉積物 活體 細(xì)胞 分離 方法 | ||
1.一種船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:包括如下步驟:
(1)采集船舶壓載艙的沉積物,置于培養(yǎng)皿內(nèi);
(2)用過濾海水沖洗沉積物,并采用第一篩絹過濾,保存沖洗后的液體;
(3)將保存的液體采用第二篩絹過濾,保留所述第二篩絹上的殘留物;
(4)用飽和蔗糖溶液沖洗所述第二篩絹上的殘留物至離心管;
(5)將所述離心管離心;
(6)吸取所述離心管的所有上清液,采用第三篩絹過濾,保留所述第三篩絹上的殘留物;
(7)用過濾海水漂洗所述第三篩絹上的殘留物至培養(yǎng)皿中,實(shí)現(xiàn)活體細(xì)胞的分離,在顯微鏡下觀察活體細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:所述第一篩絹的孔徑為200~250微米,所述第二篩絹和所述第三篩絹的孔徑為30~50微米。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:步驟(4)中所述飽和蔗糖溶液的濃度為200-220克蔗糖/100毫升蒸餾水。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:步驟(5)中的所述離心采用臺式離心機(jī),轉(zhuǎn)速為1000-1200rpm,離心時間為3-5分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:所述步驟(2)和(7)中的過濾海水為0.15微米濾膜過濾后的海水。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的船舶壓載艙沉積物中活體細(xì)胞的分離方法,其特征在于:步驟(1)中稱取5克所述沉積物置于培養(yǎng)皿內(nèi),步驟(2)和步驟(7)中的過濾海水的用量均為100毫升,步驟(4)中所述飽和蔗糖溶液用量為100毫升。
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