[發(fā)明專利]一種塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410263701.4
• 申請日: 2014-06-13
• 公開（公告）號: CN104017841A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜孟浩;張金萍;胡立松
• 申請（專利權(quán)）人: 中國林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 寧波市鄞州盛飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33243
• 代理人: 張向飛

1.一種塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝，其特征在于，所述工藝包括如下步驟：

S1、斜面菌種活化培養(yǎng)：將塊菌菌種接種于PDA培養(yǎng)基上，進(jìn)行斜面菌種的培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度22-27℃，培養(yǎng)時間5-10天；

S2、液體菌種的制備：挑取步驟S1中活化好的斜面菌種，將其轉(zhuǎn)接入裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中，置于搖床中培養(yǎng)制得液體菌種，培養(yǎng)條件為：溫度為22-27℃，搖床轉(zhuǎn)速為100-180r/min，培養(yǎng)時間為5-8天；所述液體培養(yǎng)基的組成成分為：葡萄糖：15-25g/L，酵母：1.5-2.5g/L，麥芽提取物：2.5-7.5g/L，KH₂PO₄：0.5-1.5g/L，MgSO₄.7H₂O：0.25-0.75g/L，維生素B1：100μg/L，余量為蒸餾水，pH值為6.0-8.0；

S3、液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟S2中制得的液體菌種接種到裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)得到塊菌菌絲體，經(jīng)提取制得塊菌多糖；其中，發(fā)酵條件為：攪拌速度為200r/min，溶氧為50％，pH值為6.0-8.0，溫度22-27℃，時間5-8天；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成成分為：葡萄糖：15-25g/L，麥芽提取物：2.5-7.5g/L，KH₂PO₄：0.5-1.5g/L,MgSO₄.7H₂O：0.25-0.75g/L，水解乳蛋白：25-35g/L，維生素B1：100μg/L，余量為蒸餾水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝，其特征在于，步驟S1中所述的塊菌菌種為印度塊菌(Tuber?Indicum)、臺灣原生塊菌(TuberFormosanum)、意大利白塊菌(TuberMagnatum)、法國黑孢塊菌(TuberMelanosporum)、假凹陷塊菌(TuberPseudoexcavatum)中的一種或多種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝，其特征在于，步驟S2中所述的液體培養(yǎng)基的組成成分為：葡萄糖：20g/L，酵母：2.0g/L，麥芽提取物：5.0g/L，KH₂PO₄：1.0g/L，MgSO₄.7H₂O：0.5g/L，維生素B1：100μg/L，余量為蒸餾水。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝，其特征在于，步驟S3中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的組成成分為：葡萄糖：20g/L，麥芽提取物：5.0g/L，KH₂PO₄：1.0g/L，MgSO₄.7H₂O：0.5g/L，維生素B1：100μg/L，水解乳蛋白：30g/L，余量為蒸餾水。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的塊菌液體發(fā)酵生產(chǎn)塊菌多糖的工藝，其特征在于，步驟S3中所述的接種量為200-800mg/L。