[發明專利]利用HPLC測定尼扎替丁及注射制劑中有關物質的方法

無效

• 申請號: 201410263615.3
• 申請日: 2014-06-13
• 公開（公告）號: CN104076101A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 門毅
• 申請（專利權）人: 門毅
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 北京市合德專利事務所 11244
• 代理人: 王文會;劉榜美

技術領域

本發明涉及尼扎替丁及注射制劑中有關物質的檢測方法，具體涉及一種利用HPLC（高效液相色譜）測定尼扎替丁及注射制劑的降解產物的方法。?

背景技術

尼扎替丁(英文名稱：Nizatidine、Axid、Nizax、Caemaxid)為一種強效的H₂受體拮抗劑，以噻唑環取代了雷尼替丁的呋喃環，基本化學結構與法莫替丁相似。其分子式為C₁₂H₂₁N₅O₂S₂，分子量為331.46。?

尼扎替丁是繼西咪替丁、雷尼替丁之后療效更高、不良反應更少，在消化性潰瘍疾病更具競爭力的優勢品種。?

尼扎替丁是一個含有氨基的噻唑類化合物，因此其在水溶液或固體存放中極不穩定，即使在室溫下放置也極易產生大量雜質，給用藥的安全性帶來隱患，因此通過對尼扎替丁或其制劑的檢測來判斷其是否可用于臨床在本領域非常必要的。?

現有技術中針對尼扎替丁原料標準（USP27）、尼扎替丁原料標準（BP2011）、尼扎替丁原料標準（EP7.5）、尼扎替丁膠囊標準（USP27）及尼扎替丁注射液標準?（BP2011）中有關物質測定色譜條件有較大差別，主要體現在洗脫方法和限度兩個方面：1、洗脫方法的差異：尼扎替丁膠囊標準（USP27）使用等度洗脫法，而其他4個標準均為梯度洗脫法；2、洗脫流動相的差異：尼扎替丁注射液標準（BP2011）使用的流動相為醋酸銨緩沖液:甲醇=76：24或醋酸銨緩沖液:甲醇=50：50，而另外3個原料標準流動相為醋酸銨緩沖液；3、限度差異：上述4個標準中的限度有較大差別，其中USP27、EP7.5和BP2011中原料標準限度一致均為單個雜質峰面積不得過0.3%,所有雜質峰面積的和不得過1.5%；尼扎替丁膠囊（USP27）的限度為單個雜質峰面積不得過0.5%,所有雜質峰面積的和不得過1.5%；尼扎替丁注射液（BP2011）的限度為雜質E不得過2%；雜質F不得過1%；其他單個雜質峰面積不得過0.3%；其他總雜質峰面積不得過3.5%。?

本發明旨在提供一種更方便、快捷，能夠準確檢測尼扎替丁及其注射制劑中雜質含量的方法。本發明使用了分離效果更好的梯度洗脫法，并進行了有針對性的專屬性研究；增加了雜質F的分離度檢測，并創新性的增加了一個熱破壞雜質的分離適用性，這兩個適用性選擇條件的增加可以檢測到以前任何方法都檢測不到的雜質：尤其是經熱降解產生的主色譜峰前的一雜質，TTR=0.94；此適用性能夠將與主成分峰較接近且容易重疊在一起的熱降解雜質。?

發明內容

本發明提供一種快速分析分離尼扎替丁及注射制劑中的降解產物的高效液相色譜法，從而實現了尼扎替丁及其相關制劑中的有關物質在同一色譜條件下的分離測定。?

所述有關物質包括（參見表1）：?

儀器

液相色譜儀：戴安U3000高效液相色譜儀，包括四元泵（LPG-3400D）、自動進樣器（WPS-3000）、柱溫箱（TCC-3000RS）、DAD檢測器（DAD-3000）、變色龍色譜工作站。島津LC-10AT?系列色譜儀，包括LC-10AT?VP高壓輸液泵、SPD-10A?VP紫外檢測器、LC?Solution色譜工作站。

有關物質測定方法驗證總結?

強制破壞試驗

??????檢測試劑：尼扎替丁注射制劑，按照中國專利申請CN103462909A的方法自制的制劑。

流動相選擇：流動相A為醋酸銨緩沖液（取5.9g醋酸銨，加水溶解并稀釋至760ml，加入1ml二乙胺，用醋酸調節pH值至7.5），流動相B為甲醇。?

系統適用性樣品：分別取尼扎替丁對照品和尼扎替丁雜質F對照品適量，用流動相A-B（76:24）混合液溶解并制成每1ml中各含50μg的混合溶液，量取20μl進樣，記錄色譜圖。?

熱破壞樣品??精密稱取尼扎替丁注射制劑內容物適量（約相當于尼扎替丁10mg），置10ml量瓶中，用流動相A-B（76:24）混合液溶解并稀釋至刻度，搖勻，密封，置105℃烘箱中，加熱15min后，進樣，記錄色譜圖。?