[發明專利]LPNISKP修飾的5-氟尿嘧啶，其制備，納米結構，活性及應用

在審

• 申請號: 201410261674.7
• 申請日: 2014-06-11
• 公開（公告）號: CN105294836A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: 趙明;彭師奇;王玉記;吳建輝;王松偉
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/02;A61K38/08;A61P35/00;B82Y30/00
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技術領域

本發明涉及5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro的正規簡稱是LPNISKP。涉及它的制備方法，涉及它的納米結構，涉及它的體內外抗腫瘤作用，涉及它抗腫瘤細胞粘附侵襲和遷移的作用。因而本發明涉及它在制備抗腫瘤藥物，制備抗腫瘤細胞遷移粘附和侵襲藥物中的應用。本發明屬于生物醫藥領域。

背景技術

5-氟尿嘧啶是一臨床常用的抗腫瘤藥物，它可用于多種癌癥的治療，胃癌，肝癌，結腸等。雖然5-氟尿嘧啶對于腫瘤的治療有不錯的療效，但其也存在一些不容忽視的問題。例如體內半衰期短，口服生物利用度低，給藥劑量與中毒劑量相近，毒副作用大。為了能更好地發揮5-氟尿嘧啶的抗腫瘤作用，提高其抑瘤效果、減少毒副作用。多年來人們對5-氟尿嘧啶進行了大量的修飾工作，合成了多種5-氟尿嘧啶衍生物，如在5-氟尿嘧啶上引入葡萄糖、卟啉類化合物，金屬配合物，氨基酸和短肽等。遺憾的是這些努力并沒有獲得期待的結果。在5-氟尿嘧啶的結構修飾中，還有將RGD三肽引入的合成研究。因為在一些重要的研究中，RGD三肽已確認對整合素受體沒有識別作用，所以這種修飾是一種目標含糊的化學工作，對5-氟尿嘧啶沒有任何生物學意義。

RGD四肽，即RGDS，RGDF和RGDV是整合素α_Vβ₃的阻斷劑，具有抗血栓和抗細胞粘附活性。層粘連蛋白-111(laminin-111)參與到腫瘤的生長、浸潤、轉移、粘附和血管生成等多個生理過程。Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro序列位于層連蛋白-111的β1鏈上，申請人曾經報道在濃度為1μM時它可以抑制腫瘤細胞粘附和浸潤。申請人曾經把它們與雌激素偶聯，制備沒有凝血副作用的抗骨質疏松劑。申請人曾經把它們與四氫-β-咔啉-3-羧酸偶聯制備高效的抗血栓劑。申請人也曾經用氨基酸修飾四氫-β-咔啉-3-羧酸、β-咔啉-3-羧酸及1-位取代的β-咔啉-3-羧酸，包括1-位取代的四氫-β-咔啉-3-羧酸或1-位取代的β-咔啉-3-羧酸制備高效的抗血栓劑或抗腫瘤劑。圖1是發明人創造的結構類型的代表。盡管發明人付出了大量研究精力，篩選了數百種化合物，一直沒有得到同時具有抗腫瘤和抗腫瘤粘附浸潤和遷移作用的化合物。

發明人在分析數百種化合物的結構及活性變化的基礎上，認識到將Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro與5-氟尿嘧啶偶聯，形成的5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro會同時具有抗腫瘤和抗腫瘤細胞粘附浸潤和遷移作用。基于這個認識，發明人提出了本發明。

發明內容

本發明的第一個內容是提供下面結構的5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。

本發明的第二個內容是提供5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro的制備方法，該方法由以下步驟構成：

(1)60℃5-氟尿嘧啶先在溴乙酸乙酯溶液和30％NaOH水溶液中反應10h，反應化合物然后在冰水浴用濃鹽酸處理生成5-氟尿嘧啶-1-基乙酸；

(2)采用液相合成制備Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl；

(3)將Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl與5-氟尿嘧啶-1-基乙酸偶聯，制備5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl；

(4)將5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl脫保護，制備5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。

本發明的第三個內容是評價5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro抑制細胞增殖的活性。

本發明的第四個內容是評價5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro對荷S180小鼠腫瘤生長的抑制作用。

本發明的第五個內容是評價5-氟尿嘧啶-1-基乙酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro抗腫瘤細胞粘附侵襲和遷移作用。

附圖說明

圖1.發明人創造的抗腫瘤活性化合物的結構類型代表，式中AA為L-氨基酸或甘氨酸。