[發(fā)明專利]具有抗菌抗病毒活性的小分子肽及其活性修飾物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410259060.5
• 申請(qǐng)日: 2014-06-11
• 公開（公告）號(hào): CN104072579B
• 公開（公告）日: 2017-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何堅(jiān);劉叔文;林冬果;方堉欣;王靜瑜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K5/09
• 分類號(hào): C07K5/09;C07K5/11;C07K7/06;A61K38/06;A61K38/07;A61K38/08;A61P31/04;A61P31/10;A61P31/12;A61P31/16;A61P31/18;C12N15/11
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司44205
• 代理人: 鄭瑩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及新型抗菌肽及其衍生物，具體涉及具有抗菌抗病毒活性的小分子肽及其活性修飾物。

背景技術(shù)

傳統(tǒng)抗生素細(xì)菌耐藥性已成為一個(gè)全球問題，迫切需要開發(fā)出新的抗菌藥物。為了解決這個(gè)問題，抗菌肽(AntimicrobiaL?peptides?AMPs)已成為有潛力的可治療耐藥病原體引起的傳染病?？咕氖巧矬w在外界病原微生物入侵時(shí)產(chǎn)生的具有抗菌活性的多肽物質(zhì)，通常由12-45個(gè)氨基酸組成，分子量約40kD，是生物體非特異性免疫的重要組成部分。抗菌肽一級(jí)結(jié)構(gòu)具有典型的特征，即N端富含Lys和Arg等極性氨基酸，而C端富含Ala、Val和Gly等非極性氨基酸，中間部分富含Pro，因此抗菌肽主要以陽離子形式存在。這類分子具有較強(qiáng)的保守性，同時(shí)具有分子量低、穩(wěn)定性好、副作用小、水溶性強(qiáng)、強(qiáng)堿性、廣譜抗菌、無耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，廣泛分布于哺乳動(dòng)物、無脊椎動(dòng)物、植物和微生物中，能產(chǎn)生天然的適應(yīng)性免疫防御入侵的病原體?？咕牡男蛄泻投?jí)結(jié)構(gòu)不同，但總是折疊成一個(gè)兩性分子的構(gòu)象與生物膜相互作用，同時(shí)帶有正電荷，使其能與帶負(fù)電荷的細(xì)菌膜相互作用。因此，AMPs對(duì)細(xì)菌、真菌、病毒、寄生蟲、腫瘤具有殺傷作用，尤其是多種抗生素耐藥的微生物如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐藥銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌等。

抗菌肽的出現(xiàn)為人們尋找理想的抗菌藥物提供新的領(lǐng)域，因此抗菌肽具有巨大的應(yīng)用潛力。自從Boman等人在1972年首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了抗菌肽，隨后1981年Steiner等人又從美國(guó)天蠶中成功地分離到兩種抗菌肽Cecropin-A和Cecropin-B后，截止2014年初，已發(fā)現(xiàn)的天然AMPs超過2000條。近年來，計(jì)算機(jī)輔助藥物分子設(shè)計(jì)技術(shù)的發(fā)展，極大的促進(jìn)了抗菌肽的研究和開發(fā)，已有超過十個(gè)根據(jù)天然陽離子抗菌肽合成的類似物進(jìn)入臨床或臨床前的試驗(yàn)階段，典型的代表是蛙皮提取的Magainins是第一種進(jìn)入藥品開發(fā)程序的抗菌肽，美國(guó)馬蓋寧制藥公司已經(jīng)開發(fā)篩選出對(duì)細(xì)菌、病毒和腫瘤細(xì)胞均有明顯的殺傷作用的兩種新型抗菌肽：Pexiganan(MSI-78)和MAI1278現(xiàn)已進(jìn)入臨床III期試驗(yàn)，可以預(yù)測(cè)在不久的將來抗菌肽將會(huì)成為尋找新藥的重要領(lǐng)域。TriPep公司正在研制的小肽GPG，已經(jīng)在歐洲進(jìn)行I/II期臨床試驗(yàn)，治療兩周以上發(fā)現(xiàn)，病毒復(fù)制減慢，顯示出一定的抗HIV應(yīng)用前景；口服抗菌肽Ambicin和Isegangn已成功地完成I期安全性評(píng)價(jià)；加拿大MicroLogix生化技術(shù)公司的兩種抗菌肽MBI-226和MBI-594進(jìn)入II期或III期的嚴(yán)重粉刺感染的臨床研究，其中MBI-226III期臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，在誘導(dǎo)期只有極小的刺激反應(yīng)，與陰性組對(duì)照，蓄積刺激反應(yīng)更小。最引人注目的Trimeris公司的抗HIV抗菌肽Enfuvritide(T20)已在數(shù)年前成功上市。

目前許多抗生素已產(chǎn)生抗藥性，肽類抗菌物質(zhì)具有獨(dú)特的抗菌機(jī)制，對(duì)真核細(xì)胞幾乎沒有作用，僅僅作用于原核細(xì)胞和發(fā)生病變的真核細(xì)胞，且不易產(chǎn)生耐藥性，因此在不久的將來，這些肽類抗菌物質(zhì)可能成為新型抗菌藥物的來源，具有極好的市場(chǎng)開發(fā)與應(yīng)用前景。

隨著微生物學(xué)的發(fā)展，與傳統(tǒng)抗生素相比，AMPs獨(dú)特的作用機(jī)制使其具有高效和低耐藥性的優(yōu)勢(shì)。盡管AMPs具有一定的優(yōu)勢(shì)，然而到目前為止較少AMPs藥物達(dá)到臨床實(shí)用的要求。因?yàn)锳MPs存在生物利用度、毒性、穩(wěn)定性和生產(chǎn)成本等問題。為了改善AMPs的屬性，使其能開發(fā)成藥物，合理的設(shè)計(jì)是解決問題的方法。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述存在的問題，本發(fā)明合成了由3～7個(gè)氨基酸組成的超短抗菌肽及其活性修飾物，其不僅會(huì)大大地減少生產(chǎn)成本，進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化后還顯著降低可能引起的免疫原性反應(yīng)。

本發(fā)明的目的在于提供抗菌抗病毒活性的小分子肽及其活性修飾物。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：

具有抗菌抗病毒活性的小分子肽及其活性修飾物，所述小分子肽的氨基酸序列3～7個(gè)氨基酸組成，其氨基酸序列通式為X_0-3(R/K/O/D_ab)X_0-1W_1-2(R/K/O/D_ab)_0-1X_0-1；

其中X選自氨基酸R，K，W，I中任一種；

X_0-3表示氨基酸R，K，W，I中任意0～3個(gè)；

X_0-1表示氨基酸R，K，W，I中任意0～1個(gè)；

W_1-2表示1個(gè)或2個(gè)氨基酸W；