[發明專利]假交替單胞菌胞外多糖在抑制乳腺癌細胞增殖中的應用

有效

• 申請號: 201410256245.0
• 申請日: 2014-06-10
• 公開（公告）號: CN104000839A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 陳靠山;石磊;郭默然;于志丹;樊恒達
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61K31/715
• 分類號: A61K31/715;A61P35/00;A61P15/14
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 朱家富

1.一種假交替單胞菌(Pseudoaltermonas?sp.)S-5胞外多糖在制備抑制乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖藥物中的應用；所述的胞外多糖按如下步驟制備：

(1)將菌種保藏號為CGMCC?NO.3433的假交替單胞菌(Pseudoaltermonas?sp.)S-5經活化、擴大培養后，制得擴繁菌種；

(2)將步驟(1)制得的擴繁菌種接種于發酵培養基中，向發酵培養基中加入發酵培養基重量0.3％的滅菌豆油后，7-9℃有氧攪拌培養50～60h，攪拌速度160～170r/min，得液體發酵液；

(3)將步驟(2)制得的液體發酵液離心，收集上清液；

(4)將步驟(3)制得的上清液在50～60℃條件下，旋轉蒸發濃縮至原體積的1/4，得濃縮液，然后向濃縮液中加入體積百分比為95％的乙醇，經醇沉后，離心，收集沉淀；

(5)將步驟(4)收集的沉淀用水溶解，加入1/3體積的seveage試劑脫去蛋白質，制得粗糖溶液；

(6)將步驟(5)制得的粗糖溶液通過大孔樹脂D-301R脫色后，再經過DEAE-Fast?Flow陰離子交換柱和Sephadex?G-75層析柱分離，制得純化的胞外多糖溶液；

(7)將步驟(6)制得的胞外多糖溶液經真空冷凍干燥后，制得適冷微生物胞外多糖純品；

所述步驟(2)中的發酵培養基組分如下，均為重量百分數：蛋白胨0.5％，酵母粉0.1％，葡萄糖2％，氯化鈉2％，人工海水余量，pH7.0。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的胞外多糖成分如下：

假交替單胞菌(Pseudoaltermonas?sp.)S-5胞外多糖的分子量為397kDa，由甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成，其摩爾比為4.8:50.9:44.3。

3.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的藥物包括藥效成分為假交替單胞菌S-5胞外多糖以及藥學上可接受的輔料。