[發明專利]Trp-Trp-Trp十肽修飾的β-咔啉，其制備，納米結構，活性和應用

在審

• 申請號: 201410255237.4
• 申請日: 2014-06-11
• 公開（公告）號: CN105273053A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發明（設計）人: 趙明;彭師奇;王玉記;吳建輝;王程榮
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/107;C07K1/06;A61K38/08;A61P35/00;B82Y30/00
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技術領域

本發明涉及1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。涉及它的制備方法，涉及它的納米結構，涉及它的體內外抗腫瘤作用，涉及它抗腫瘤細胞粘附侵襲和遷移的作用。因而本發明涉及它在制備抗腫瘤藥物、制備抗腫瘤細胞粘附侵襲和遷移藥物中的應用。本發明屬于生物醫藥領域。

技術背景

惡性腫瘤嚴重威脅人類的健康。除了自身對腫瘤患者的預后惡劣之外，惡性腫瘤并發的炎癥和轉移進一步惡化患者的預后。例如，超過90％以上的惡性腫瘤患者都是死于腫瘤轉移。

由于現有抗腫瘤藥物不具備抗腫瘤細胞遷移粘附和侵襲作用，所以療效不理想。發明同時具有抗腫瘤和抗腫瘤細胞遷移粘附和侵襲作用的藥物是臨床的迫切需求。

RGD四肽，即RGDS，RGDF和RGDV是整合素α_Vβ₃的阻斷劑，具有抗細胞粘附活性。申請人發現，Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro(LPNISKP)在1μM濃度下則能抑制HCCLM6的運動和侵襲。申請人曾經把它們與雌激素偶聯，制備沒有凝血副作用的抗骨質疏松劑。申請人曾經把它們與四氫-β-咔啉-3-羧酸偶聯制備高效的抗血栓劑。申請人也曾經用氨基酸修飾四氫-β-咔啉-3-羧酸、β-咔啉-3-羧酸及1-位取代的β-咔啉-3-羧酸，包括1-位取代的四氫-β-咔啉-3-羧酸或1-位取代的β-咔啉-3-羧酸制備高效的抗血栓劑或抗腫瘤劑。下面是發明人創造的結構類型的代表。盡管發明人付出了大量研究精力，篩選了數百種化合物，一直沒有得到同時具有抗腫瘤和抗腫瘤細胞遷移粘附和侵襲轉移作用的化合物。

發明人在分析數百種化合物的結構及活性變化的基礎上，認識到將Trp-Trp-Trp-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro與1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-羧酸偶聯，形成的1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro，會同時具有抗腫瘤和抗腫瘤細胞遷移粘附和侵襲作用。基于這個認識，發明人提出了本發明。

發明內容

本發明的第一個內容是提供下面結構的1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。

本發明的第二個內容是提供1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro的制備方法，該方法包括：

(1)在二氯亞砜(SOCl₂)的存在下，L-色氨酸和甲醇反應，生成L-色氨酸甲酯；

(2)在三氟醋酸存在下，在水中4-異丙基苯甲醛(枯茗醛)和L-色氨酸甲酯縮合為(3S)-1-(4-異丙基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯；

(3)在二氧化硒(SeO₂)的存在下，(3S)-1-(4-異丙基苯基)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯在二氧六環中氧化1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-羧酸甲酯；

(4)冰浴下在氫氧化鈉的水溶液(2M)和甲醇中，1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-羧酸甲酯轉化為1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-羧酸；

(5)采用逐步縮合法，在N，N-二環己基碳二亞胺(DCC)和N-羥基苯并三氮唑(HOBt)存在下，在干燥四氫呋喃(THF)中反應，得到全保護多肽序列Boc-Trp-Trp-Trp-OBzl；

(6)冰浴下在氯化氫的乙酸乙酯溶液中(4M)，全保護多肽序列Boc-Trp-Trp-Trp-OBzl脫除Boc得Trp-Trp-Trp-OBzl；

(7)在N，N-二環己基碳二亞胺(DCC)和N-羥基苯并三氮唑(HOBt)存在下，1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-羧酸在無水四氫呋喃(THF)中與Trp-Trp-Trp-OBzl縮合為1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-OBzl；

(8)冰浴下在氫氧化鈉的水溶液(2M)和甲醇中，化合物1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp-OBzl轉化為1-(4-異丙基苯基)-β-咔啉-3-甲酰-Trp-Trp-Trp；