[發明專利]水仙花中β-胡蘿卜素的提取分離方法

有效

• 申請號: 201410253476.6
• 申請日: 2014-06-09
• 公開（公告）號: CN104059008A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 李欣;史益敏;盧敏
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07C403/24
• 分類號: C07C403/24
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 牛山;陳少凌

技術領域

本發明涉及植物中色素的提取方法，具體地，涉及一種水仙花中β-胡蘿卜素的提取分離方法。

背景技術

水仙是石蒜科(Amaryllidaceael)水仙屬(Narcissus)多年生草本植物，是一種重要的觀賞花卉。有研究發現水仙花中最主要的色素成分為類胡蘿卜素。類胡蘿卜素是一類重要的天然色素，主要包括胡蘿卜素類和葉黃素類。其中β-胡蘿卜素是胡蘿卜素類最重要的一種化合物，且具有廣泛的抗氧化、抗腫瘤和消炎功效。

β-胡蘿卜素在類胡蘿卜素定性定量分析中廣泛被用作標準品使用，但由于提取工藝復雜、合成困難、成本較高、且易氧化、易光解的特性而致使其價格昂貴。目前已發現一些從植物中獲取類胡蘿卜素的相關報道，如專利號201010515845.6使用乙醚等有機溶劑提取了野菊花中類胡蘿卜素混合物，專利號201210097866通過無溶劑提取法獲得了類胡蘿卜素混合物，并推薦直接用作食品添加劑，專利號201010233243.1使用乙醇及微波輔助提取方式獲取類胡蘿卜素混合物。然而，針對類胡蘿卜素中高純度的β-胡蘿卜素的提取分離方式尚未見報道。

發明內容

針對現有技術中的缺陷，本發明的目的是提供一種水仙花中β-胡蘿卜素的提取分離方法。本發明采用的為大杯狀副冠型水仙品種Narcissus pseudonarcissus‘Prof.Einstein’，其副冠為橙紅色。本發明對其花色成分初步定性分析發現其副冠內含大量β-胡蘿卜素。因此，本文以N.pseudonarcissus‘Prof.Einstein’為植物材料，不僅發現新型的天然源的類胡蘿卜素，而且為制備廉價β-胡蘿卜素標準品提供了可能。

本發明是通過以下技術方案實現的：

本發明涉及一種水仙花中β-胡蘿卜素的提取分離方法，包括如下步驟：

步驟一，取水仙花的副冠組織，凍干并研磨至粉狀，加入色素提取液，超聲提取；

步驟二，加入正己烷萃取，將萃取液合并洗滌，離心、真空濃縮、皂化、二次洗滌、二次濃縮、溶解即可。

優選地，包括如下步驟：

步驟一，取新鮮的水仙花的副冠組織，加液氮凍干并研磨至粉狀，加入色素提取液，超聲提取；

步驟二，加入料液比(副冠組織g:正己烷ml)為1-2:5-20的正己烷，萃取至下層為無色，合并各萃取液；

步驟三，向萃取液內加入料液比(副冠組織g:飽和NaCl溶液ml)為1-2:10-30的飽和NaCl溶液洗滌，使上清至中性，棄下層；

步驟四，將萃取液置于真空干燥箱內真空濃縮，至溶劑揮凈；

步驟五，加入料液比(副冠組織g:甲基叔丁基醚ml)為1-2:2-4的甲基叔丁基醚溶液溶解，同時加入料液比(副冠組織g:10％KOH-甲醇溶液ml)為1-2:4-10的10％KOH-甲醇溶液，避光皂化；

步驟六，向皂化液內加入料液比(副冠組織g:飽和NaCl溶液ml)為1-2:4-10的飽和NaCl溶液和料液比(副冠組織g:甲基叔丁基醚ml)為1-2:2-4的甲基叔丁基醚溶液使其分層，同時加入料液比(副冠組織g:飽和NaCl溶液ml)為1-2:10-30的飽和NaCl溶液洗滌至中性，棄下層；

步驟七，取上層至離心管內，置于真空干燥箱內二次真空濃縮至干，即得橙紅色β-胡蘿卜素粉末；

步驟八，將β-胡蘿卜素粉末溶解于料液比(副冠組織g:甲基叔丁基醚ml)為1-2:1-2的甲基叔丁基醚溶液內，即可。

優選地，所述水仙花的為Narcissus pseudonarcissus‘Prof.Einstein’。

優選地，步驟一中，所述色素提取液組成為正己烷：丙酮：無水乙醇：水＝6-12:1-3:1-3:0.5-1。

優選地，所述水仙花的副冠組織與所述色素提取液的質量體積比為1-3:20-50。

優選地，所述皂化的時間為2-5h，溫度為18-25℃。

優選地，所述真空濃縮的壓強為100-800Pa，溫度45-70℃。

優選地，所述甲基叔丁基醚溶液中含有抗氧化劑BHT，其含量為0.005-0.1％。

優選地，所述超聲提取的時間為30-120min。

與現有技術相比，本發明具有如下的有益效果：

1.本發明方法獲得的β-胡蘿卜素樣品液的純度達98％以上，可直接作為高效液相色譜級標準品使用。

2.本發明材料來源廣泛、操作簡便、成本低廉、純度較高，適用于天源β-胡蘿卜素標準品的制備。

具體實施方式