[發(fā)明專利]一種耐油具柄菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410252837.5
• 申請日: 2014-06-09
• 公開（公告）號: CN103981140A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張曉華;湯開浩;史曉翀;蘇穎;張?zhí)N慧
• 申請（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01N63/02;A01P1/00;A23K1/16;A23K1/165;C02F3/34;C12N9/18;C12N15/55;C12R1/01
• 代理公司: 青島海昊知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于有益菌篩選技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種耐油具柄菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，抗生素是公認的治療細菌性疾病的有效方法，傳統(tǒng)的抗生素主要通過抑制細胞壁的合成、DNA的復(fù)制、RNA的轉(zhuǎn)錄以及蛋白質(zhì)的合成等一些微生物所必需物質(zhì)的合成或代謝途徑，殺死細菌或抑制細菌的繁殖，從而實現(xiàn)對細菌性疾病的治療目的。這種“生”或“死“的選擇性壓力，使隨機突變產(chǎn)生的抗生素抗性基因得以保留，從而導(dǎo)致抗生素抗性突變的細菌迅速成為微生物群落中的優(yōu)勢種群，進而導(dǎo)致細菌抗藥性的產(chǎn)生。而抗生素的濫用進一步加快了細菌抗藥性的出現(xiàn)。與此同時新型抗生素的研發(fā)速度已經(jīng)大大降低，往往新型抗生素推廣到市場后的幾年內(nèi)就會有相應(yīng)的抗性細菌出現(xiàn)。這樣的現(xiàn)狀促使人們開發(fā)一種不同于傳統(tǒng)抗生素作用機制的新型細菌性疾病治療手段。其中一種具開發(fā)前景的方法被稱為抗毒力治療(antivirulence?therapy)，該方法是以細菌的毒力因子本身(毒力因子的表達、功能及運輸以及細菌的粘附作用等)為靶位，而不是上述微生物所必需的物質(zhì)合成或代謝途徑，因此從理論上來說能夠大大降低其使用過程中對細菌產(chǎn)生的選擇性壓力從而有效降低產(chǎn)生細菌抗藥性的幾率。

密度感應(yīng)(quorum?sensing,QS)在1994被首次提出，用來描述夏威夷魷魚發(fā)光器官中的費氏弧菌(Vibrio?fischeri)通過分泌和識別化學(xué)信號分子(autoinducers,AIs)來檢測種群密度，從而在群體水平上協(xié)調(diào)其熒光素酶基因(luxABCDE)表達的現(xiàn)象。目前已經(jīng)報道的信號分子主要有革蘭氏陰性菌的N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯分子(N-acyl?homoserine?lactone，AHL)、革蘭氏陽性菌的寡肽分子(autoinducing?peptide，AIP)以及在革蘭氏陰性和陽性菌中普遍存在的AI-2分子。研究發(fā)現(xiàn)，銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)、胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwinia?carotovora)、弧菌屬(Vibrio)和伯克氏菌屬(Burkholderia)等多種致病菌中致病因子的分泌和AHL類QS密切相關(guān)。另外，生物被膜(biofilm)在致病菌的宿主防御機制以及抗生素的抗藥性中起關(guān)鍵作用，它的形成也受QS的調(diào)控作用。由于QS系統(tǒng)不是微生物生存所必需的，因此淬滅密度感應(yīng)(quorum?quenching,QQ)可以在不殺死細菌的情況下大大地降低其毒力的表達，同時大大降低環(huán)境中的選擇壓力以及出現(xiàn)細菌抗藥性的幾率，因此密度感應(yīng)淬滅技術(shù)是極具開發(fā)前景的一種抗毒力治療手段。

目前發(fā)現(xiàn)的AHL類的QS系統(tǒng)的密度感應(yīng)淬滅活性物質(zhì)主要有信號分子降解酶和QS阻抑小分子物質(zhì)。小分子阻抑物主要有呋喃酮、肉桂醛及其衍生物和信號分子類似物。動物模型侵染實驗表明呋喃酮和肉桂醛等小分子阻抑物能夠大大降低哈維氏弧菌和銅綠假單胞菌等致病菌的致病性。目前在很多種細菌中發(fā)現(xiàn)了信號分子降解酶，根據(jù)降解機制的不同可分為三類：AHL內(nèi)酯酶(內(nèi)酯環(huán)水解作用)，AHL酰基轉(zhuǎn)移酶(氨基水解作用)以及AHL氧化還原酶(氧化還原作用)。AHL降解酶尤其是AHL內(nèi)酯酶對不同長度酰基鏈的信號分子(C4-C12)均具有高效的降解活性。動物實驗表明，在畢赤酵母表達系統(tǒng)中過量表達的AHL內(nèi)酯酶(AiiA)和嗜水氣單胞菌混合注射鯉魚能大大降低鯉魚的致死率。AHL降解菌株的富集培養(yǎng)液能提高鹵蟲和大菱鲆的成活率以及增強羅氏沼蝦對哈維氏弧菌的抵抗力。因此在防治海水養(yǎng)殖病害方面，密度感應(yīng)淬滅菌株具有很廣闊的發(fā)展前景。

目前發(fā)現(xiàn)的密度感應(yīng)淬滅菌大多是來源于陸地，而已發(fā)現(xiàn)的25個種海洋細菌中只有邊山假交替單胞菌(Pseudoalteromonas?byunsanensis)1A01261的QQ酶獲得了鑒定。陸地來源的菌株可能會因為不適應(yīng)海水環(huán)境而不宜作為海水養(yǎng)殖的有益菌，因此從海洋或水產(chǎn)養(yǎng)殖動物環(huán)境中分離的土著QQ菌株，對密度感應(yīng)淬滅技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用尤為重要。不僅如此，許多哺乳動物及人類致病菌的毒力也受到QS調(diào)控，因此新型高活性的QQ酶具有廣闊的藥物開發(fā)前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種耐油具柄菌及其應(yīng)用，即一種能抑制致病菌毒力因子分泌的密度感應(yīng)淬滅菌株，從而彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足。

本發(fā)明的耐油具柄菌(Muricauda?olearia)LMM001菌株，已于2014年3月28日保藏在位于北京朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.8972。