[發明專利]亞甲藍的一種抗急性腦缺血損傷用途

無效

• 申請號: 201410252319.3
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號: CN104027338A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 吳麗穎;范明;朱玲玲;邸瑤;趙彤;何云凌;丁學鋒;吳奎武;黃欣;趙永岐;劉淑紅
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: A61K31/5415
• 分類號: A61K31/5415;A61P9/10;A23L1/29
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及亞甲藍的一種抗急性腦缺血損傷用途。大鼠經大腦中動脈閉塞缺血后，立即腹腔注射亞甲藍，并在缺血后多個時間點給藥，能夠明顯減小大鼠永久性腦缺血后梗死灶的體積，提高大鼠的行為能力。?

背景技術

缺血性腦卒中占腦卒中病人總數的70％-80％，它是導致成人殘疾的首因。治療缺血性腦卒中的藥物多達幾十種之多，但目前的用藥多以溶栓為主，有些藥物副作用還很大，即便如此，由于時間窗的問題(得病后6小時以內，3小時以內為黃金治療期)，在我國僅有1.6％的患者能夠得到及時的溶栓治療，即使在美國也只有5％的病人能得到及時溶栓治療。因此，能緩解急性期的腦缺血損傷和減輕隨后的永久性腦梗死的救治藥物凸顯尤為重要。?

亞甲藍(化學式C16H18ClN3S)又稱亞甲基藍、次甲基藍、次甲藍、美藍、品藍、甲烯藍、瑞士藍。亞甲藍屬于芳香雜環化合物，1876年由Heinrich?Caro合成，自1890s起用于實驗室和臨床。亞甲藍在臨床上的應用包括以下幾個方面：1.低濃度時，亞甲藍能使高鐵血紅蛋白還原為氧合血紅蛋白，故亞甲藍可治療高鐵血紅蛋白血癥。2.高濃度時，亞甲藍能將氧合血紅蛋白的鐵氧化為三價鐵，而形成高鐵血紅蛋白，利用此作用可治療氰化物中毒。3.亞甲藍能使膀胱結石溶解，故可用于尿路結石，對草酸鈣結石療效較好。4.亞甲藍與神經組織有較強的親和力，可作用于神經末梢，治療神經性皮炎。5.其他治療：亞甲藍還可以治療感染性休克、閉塞性脈管炎、血管瘤等。此外，有研究報道亞甲藍在大鼠腦缺血再灌損傷中具有保護作用，提示可能用于腦缺血溶栓治療后的保護作用。但是目前能夠及時得到溶栓治療的患者只占缺血性腦卒中患者的2％左右，亞甲藍對另外98％錯過黃金治療期而帶來的永久性神經功能損傷的患者是否能起到保護作用尚未見研究報道。?

發明內容

本發明公開了亞甲藍的一種抗急性腦缺血損傷用途。大鼠經大腦中動脈閉塞后即刻腹腔注射亞甲藍((本發明中應用的亞甲藍由Amresco公司生產，優選的用藥劑量是1mg/kg，5mg/kg，10mg/kg，更優選的是5mg/kg)，并在缺血后多個時間點繼續給藥，能夠明顯減小大鼠永久性腦缺血造成的梗死體積，改善大鼠的行為能力。通過本發明的方法，采用在適宜時間注射合適劑量的亞甲藍，就能夠提高大鼠等動物對抗急性腦缺血損傷的能力，為臨床治療缺血性腦卒中提供了有力的實驗證據。若能得以推廣到人體應用，將有較好的經濟效益和社會效益。?

本發明的申請人采用線栓法對成年大鼠進行大腦中動脈閉塞造成局灶性腦缺血，栓塞后即刻經腹腔注射不同劑量的亞甲藍，并在缺血后多個時間點給予上述劑量的亞甲藍注射，在缺血24小時后觀察大鼠的行為能力和腦梗死程度，評價亞甲藍對急性腦缺血損傷的保護作用。?

具體實施方式

材料：?

1)戊巴比妥鈉，德國進口，北京試劑公司分裝。?

2)1％戊巴比妥鈉注射液：取1g戊巴比妥鈉粉末，溶于100ml生理鹽水中，充分混勻，制成1％戊巴比妥鈉注射液100ml，用于動物麻醉，以大鼠體重為依據，按照0.5ml/100g用量使用。?

3)亞甲藍(methylene?blue，MB)分子式C16H18ClN3S是雜環芳香族染料，屬于噻嗪類染料家族，無臭深藍色晶體，溶于水和氯仿，但不溶于酒精，避光保存，Amresco公司生產，效期安全。其水溶液呈藍色，現用現配。?

4)10mg/kg亞甲藍腹腔注射液：稱取90mg亞甲藍粉末，溶于30ml生理鹽水中，充分混勻，制成3mg/ml亞甲藍腹腔注射液30ml，以大鼠體重為依據，按照0.33ml/100g用量使用，即得10mg/kg的實際用量。?

5)5mg/kg亞甲藍腹腔注射液：取上述配制的10mg/kg亞甲藍腹腔注射液10ml，溶于10ml生理鹽水?中，充分混勻，制成1.5mg/ml亞甲藍腹腔注射液20ml，以大鼠體重為依據，按照0.33ml/100g用量使用，即得5mg/kg的實際用量。?

6)1mg/kg亞甲藍腹腔注射液：取上述配制的10mg/kg亞甲藍腹腔注射液2ml，溶于18ml生理鹽水中，充分混勻，制成0.3mg/ml亞甲藍腹腔注射液20ml，以大鼠體重為依據，按照0.33ml/100g用量使用，即得1mg/kg的實際用量。?

7)氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenyltetrazolium?chloride，TTC)，分子式C19H15C1N4，白色至淺黃色結晶粉末，用作分析試劑和色譜分析試劑，sigma公司進口，避光保存。?