[發(fā)明專利]海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410251864.0
• 申請(qǐng)日: 2014-06-09
• 公開（公告）號(hào): CN104004109A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳蔭;李佩佩;王斌;牛慶鳳;李濤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江海洋學(xué)院
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從烏賊墨中提取分離純化的具有新穎結(jié)構(gòu)的胺聚糖及其提取方法，尤其涉及一種海洋硫酸酯化糖胺聚糖及其制備方法。

背景技術(shù)

隨著復(fù)雜的生物學(xué)功能被不斷揭示，多糖在免疫調(diào)節(jié)、抗凝血、抗腫瘤和調(diào)節(jié)血脂等方面得到了應(yīng)用。海洋生物處于高鹽、高壓寡營(yíng)養(yǎng)等獨(dú)特的環(huán)境中，使得很多海洋來(lái)源的多糖具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和生物功能，使得開發(fā)海洋多糖資源成為目前海洋藥物學(xué)是研究的一大熱點(diǎn)。

對(duì)海洋生物多糖研究比較多的集中在了海洋藻類多糖，目前隨著資源的進(jìn)一步開發(fā)，海洋動(dòng)物來(lái)源的多糖也越來(lái)也受到關(guān)注。鮑魚中含有硫酸化雜多糖，由半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、木糖（Xyl）、巖藻糖(Fuc)和葡萄糖醛酸(GlcUA)組成，含有11%左右的硫酸基，在免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、改善記憶、抗凝血和抗炎等方面均具有顯著的活性。海參中富含由乙酰氨基半乳糖（Gal-NAc）、葡萄糖醛酸（GlcUA）和巖藻糖(Fuc)組成的粘多糖和硫酸酯化的巖藻聚糖對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用和心血管疾病方面均具有保護(hù)作用。

烏賊又稱墨魚，海洋軟體動(dòng)物，屬頭足類。廣泛分布于我國(guó)沿海，尤以浙江省產(chǎn)量最高,?是舟山市的四大經(jīng)濟(jì)海產(chǎn)之一，烏賊墨是烏賊科動(dòng)物墨囊內(nèi)提取物質(zhì)，因其顏色和來(lái)源而得名。由細(xì)小黑色顆粒構(gòu)成的粘稠狀的混懸液，蛋白多糖復(fù)合物，含有多種活性成分，具有較高藥用價(jià)值。通常烏賊墨會(huì)作為廢棄物被扔掉，自從日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤活性后，烏賊墨的研究逐漸與日俱增，很多日本食品企業(yè)也開始將烏賊墨用于食品中。研究表明，蛋白多糖復(fù)合物是烏賊墨重要的活性成分，也是海洋特征寡糖的一大來(lái)源。對(duì)烏賊墨來(lái)源的海洋多糖的研究將有助于進(jìn)一步利用烏賊產(chǎn)品加工的廢棄物，變廢為寶，為海洋多糖糖在醫(yī)藥等領(lǐng)域的利用提供物質(zhì)基礎(chǔ)，提高了烏賊的應(yīng)用價(jià)值和產(chǎn)值。烏賊墨是烏賊加工過(guò)程中的廢棄物，研究表明新鮮烏賊墨中含有水分、色素、蛋白質(zhì)、脂肪、糖類等物質(zhì)。烏賊墨也可作為一種中藥，文獻(xiàn)上早有記載。《本草拾遺》中有：“腹中墨，主治血刺心痛”。在《本經(jīng)》中有記載：“可收斂止血，固精止帶，制酸定痛，?除濕斂瘡”。烏賊墨制劑臨床上主要作為止血?jiǎng)委煶鲅约膊∪纾汗δ苄宰訉m出血、胃出血等。中國(guó)海洋藥物辭典也收錄了烏賊墨。20?世紀(jì)90?年代，日本青森產(chǎn)業(yè)技術(shù)中心和弘前大學(xué)發(fā)現(xiàn)烏賊墨具有抗腫瘤作用，并從中提取得到一種具有高效抗癌活性的多糖－蛋白復(fù)合體，掀起了開發(fā)烏賊墨生物功能的熱潮，目前在日本主要是作為一種保健食品。

近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)烏賊墨進(jìn)行了一系列研究和開發(fā)，研究表明烏賊墨具有止血、抗腫瘤、抗氧化、抗輻射等多種生理活性，特別是對(duì)烏賊墨多糖的提取純化、結(jié)構(gòu)及生物結(jié)構(gòu)進(jìn)行了深入研究。對(duì)烏賊墨多糖的研究表明，其多糖部分主要是由等摩爾比的葡萄糖醛酸（GlcUA）、N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）和巖藻糖（Fuc）構(gòu)成的一種全新結(jié)構(gòu)的類糖胺聚糖。該多糖結(jié)構(gòu)特異，含有等比例的酸性糖、堿性糖和六碳甲基糖組成的三糖線性重復(fù)單元，中國(guó)海洋大學(xué)的研究人員也從魷魚墨中分離得到類似的但具有分支結(jié)構(gòu)的非硫酸酯化的類糖胺聚糖[→3)-β-GlcA(1→4)-α-GalNAc(1→3)-α-Fuc(1→]n，山東大學(xué)從無(wú)針烏賊墨中分離得到一種主要由巖藻糖（Fuc）、N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）和甘露糖（Man）組成的雜多糖。這些頭足動(dòng)物來(lái)源的雜多糖作為一種天然生物活性物質(zhì)，能夠抑制突變，顯著促進(jìn)機(jī)體的粒系造血機(jī)能，抑制S180肉瘤生長(zhǎng)，增強(qiáng)小鼠的特異性免疫和非特異性免疫功能，調(diào)節(jié)機(jī)體血脂代謝，提高機(jī)體抗氧化能力。可緩解環(huán)磷酰胺所致大鼠骨髓造血功能抑制作用烏賊墨多糖對(duì)環(huán)磷酰胺所致的免疫系統(tǒng)及抗氧化能力損傷具有顯著的拮抗作用和促進(jìn)其快速恢復(fù)的功效。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種能增加脾臟指數(shù)、造血功能并且對(duì)不良反應(yīng)有抑制作用的海洋硫酸酯化糖胺聚糖及其相應(yīng)的具有提取、純化工藝較簡(jiǎn)單，提取純度好、易于操作的制備方法。

本發(fā)明為解決上述問(wèn)題所采取的技術(shù)方案為：一種海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3，其單糖組分含有甘露糖：葡萄糖胺：葡萄糖醛酸：乙酰氨基半乳糖：半乳糖：巖藻糖的質(zhì)量比例為1:1.5:0.92:3:1.8:2；該海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的分子量為10kDa至16kDa，硫酸基團(tuán)的含量為10%至14%之間。

本發(fā)明為解決上述第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案為：一種海洋硫酸酯化糖胺聚糖SE-3的制備方法，其包括以下步驟：