[發(fā)明專利]一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410249893.3
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號(hào): CN103983592A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高繼慧;趙海謙;周偉;韓瑞;吳少華
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/31
• 分類號(hào): G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 牟永林

1.一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法，其特征在于一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法具體是按以下步驟完成的：

一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：將甲基亞磺酸鈉溶液分別加入到編號(hào)為①到⑥的六個(gè)容器中，其中①號(hào)加入摩爾濃度為25μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL，②號(hào)加入摩爾濃度為50μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL，③號(hào)加入摩爾濃度為75μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL，④號(hào)加入摩爾濃度為100μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL，⑤號(hào)加入摩爾濃度為150μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL；⑥號(hào)加入摩爾濃度為250μmol·L^-1的甲基亞磺酸鈉溶液1mL；然后將編號(hào)為①到⑥的容器置于暗處，分別向編號(hào)為①到⑥的容器中加入摩爾濃度為2mmol·L^-1的堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽，其中①號(hào)加入1.25mL；②號(hào)加入2.50mL，③號(hào)加入3.75mL，④號(hào)加入5.00mL，⑤號(hào)加入7.50mL；⑥號(hào)加入12.5mL；再在室溫下反應(yīng)10min，得到編號(hào)為①到⑥的含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液；再分別向編號(hào)為①到⑥的含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液中加入FeSO₄及3mL甲苯/丁醇萃取劑，萃取5min，去除下層液，得到編號(hào)為①到⑥的3mL上層萃取液；再分別向編號(hào)為①到⑥的3mL上層萃取液中加入1mL吡啶，得到編號(hào)為①到⑥的待測萃取液；用1cm比色皿，丁醇試劑空白作參比，測定425nm處編號(hào)為①到⑥的待測萃取液的吸光度；以吸光度為縱坐標(biāo)，以甲基亞磺酸鈉濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

步驟一中所述的FeSO₄的物質(zhì)的量與編號(hào)為①到⑥的含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液的體積比為(200mmol～500mmol):1L；

步驟一中所述的甲苯/丁醇混合萃取劑中甲苯與丁醇的摩爾比為2:1；

二、回歸方程的獲得：

根據(jù)步驟一的標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得回歸方程：A＝0.00476C(μmol·L^-1)+0.01271(r＝0.99951)；其中A為吸光度；C為甲基亞磺酸鈉濃度；

三、溶液中羥基自由基的測定：

①取含有羥基自由基的溶液1mL，再向1mL含有羥基自由基的溶液中加入0.002g～0.02g二甲基亞砜，得到含甲基亞磺酸的溶液；

②將含甲基亞磺酸的溶液置于暗處，加入1.25mL～12.5mL摩爾濃度為2mmol·L^-1的堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽溶液，室溫下反應(yīng)10min，得到含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液；

③向含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液中加入FeSO₄，再使用3mL甲苯/丁醇混合萃取劑對含有重氮砜產(chǎn)物混合溶液進(jìn)行萃取，萃取時(shí)間為5min，去除下層液，得到上層液；使用丁醇/水飽和溶液將上層液清洗1次～2次，再在轉(zhuǎn)速為500r/min～1000r/min的條件下離心2min～3min，再去除離心后的下層液，得到離心后的上層液；向離心后的上層液中加入吡啶，再用1cm比色皿，丁醇試劑空白作參比，在425nm處測定溶液的吸光度，根據(jù)步驟二中回歸方程計(jì)算溶液中羥基自由基濃度；

步驟三③中所述的FeSO₄的物質(zhì)的量與含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液的體積比為(200mmol～500mmol):1L；

步驟三③中所述的甲苯/丁醇混合萃取劑中甲苯與丁醇的摩爾比為2:1；

步驟三③中所述的吡啶的體積與離心后的上層液的體積比為1:3。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法，其特征在于步驟一中所述的FeSO₄的物質(zhì)的量與編號(hào)為①到⑥的含有重氮砜產(chǎn)物的混合溶液的體積比為(250mmol～450mmol):1L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法，其特征在于步驟三①中取含有羥基自由基的溶液1mL，再向1mL含有羥基自由基的溶液中加入0.002g～0.01g二甲基亞砜，得到含甲基亞磺酸的溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測溶液中羥基自由基濃度的方法，其特征在于步驟三①中取含有羥基自由基的溶液1mL，再向1mL含有羥基自由基的溶液中加入0.005g～0.02g二甲基亞砜，得到含甲基亞磺酸的溶液。