[發明專利]FXYD在制備診斷和預示肺癌標志物中的應用及FXYD雙抗夾心ELISA檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410249815.3
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號: CN104062436A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 王弢;周小進;孫玉龍
• 申請（專利權）人: 上海良潤生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

技術領域

本發明屬于檢測領域，具體涉及纖維蛋白原降解產物FXYD在制備診斷和預示肺癌標志物中的應用，還涉及檢測纖維蛋白原降解產物FXYD的雙抗夾心ELISA檢測試劑盒。

背景技術

目前，肺癌是發病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一，近50年來許多國家都報道肺癌的發病率和死亡率均明顯增高，隨著經濟的發展我國環境質量日益惡化，特別是空氣質量的不斷下降可能是導致肺癌發病率不斷攀升的原因之一。臨床研究發現，國內90％以上的癌癥個案都在二期以后才被發現，一般傳統檢測法只能偵測3～4期癌癥，對于癌癥的治療喪失了不少先期治療的機會，因此開發出能夠協助醫生診斷癌癥的初期診斷方法和試劑有助于增強我國對癌癥的防治工作，提高人民的生活水平。

纖維蛋白原降解產物(FDP)在纖溶酶的作用下，可以降解產生不同分子量的碎片X、Y、D、E以及其他一些碎片，其中分子量為X、Y、D、E的纖維蛋白原降解產物簡稱為FXYD。臨床研究發現FXYD蛋白多種癌癥患者的血清中高表達，并且將FXYD與其他腫瘤標志物并用后，可以提高檢測的敏感性。但是，FXYD與肺癌的相關性目前未見報道。因此，急需開發一種新的肺癌血清標志物，填補FXYD在亞洲人群中肺癌輔助診斷中的空白。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的之一在于提供纖維蛋白原降解產物FXYD在制備診斷和預示肺癌標志物中的應用，以進一步提高肺癌檢測的靈敏度，本發明的目的之二在于提供檢測纖維蛋白原降解產物FXYD的雙抗夾心ELISA檢測試劑盒，填補FXYD在肺癌輔助診斷和預示中的空白。

為實現上述發明目的，本發明提供如下技術方案：

1、纖維蛋白原降解產物FXYD在制備診斷和預示肺癌標志物中的應用，所述FXYD為氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的混合物。

本發明中FXYD指為分子量為X、Y、D、E的纖維蛋白原降解產物，其中分子量為D的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述分子量為E的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述 分子量為X的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述分子量為Y的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

優選的，所述診斷和預示為診斷、療效評估或復發轉移監控。

2、纖維蛋白原降解產物FXYD雙抗夾心ELISA檢測試劑盒，所述試劑盒包括包被有捕獲纖維蛋白原降解產物FXYD的捕獲劑的固相載體、酶標抗FXYD多克隆抗體、顯色底物和終止液，所述FXYD為氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的混合物。

優選的，所述固相載體為酶標板，所述顯色底物為TMB，所述終止液為2M的硫酸，所述酶標抗FXYD多克隆抗體為HRP標記的Fibrinogen γ抗體和Fibrinogen α抗體的混合物。

優選的，所述捕獲纖維蛋白原降解產物FXYD的捕獲劑為抗FDP單克隆抗體、抗FDP多克隆抗體或抗纖維蛋白原多克隆抗體。

優選的，所述試劑盒還包括質控品、稀釋液、洗滌濃縮液和封膜。

優選的，所述質控品為FDP蛋白，所述稀釋液為含質量分數為0.1％BSA的PBS緩沖液，所述洗滌濃縮液為25倍的PBST。

更優選的，所述包被有捕獲纖維蛋白原降解產物FXYD的捕獲劑的固相載體由以下方法制備：將1μg/mL捕獲纖維蛋白原降解產物FXYD的捕獲劑用包被液在4℃條件下過夜包被固相載體，洗板，然后加入質量分數為2％的BSA于37℃封閉2小時，甩干后在37℃條件下烘30分鐘。

優選的，所述包被液為pH為9.6的碳酸鹽緩沖液。