[發明專利]具有降血糖功能的二肽QN及其用途

有效

• 申請號: 201410248292.0
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號: CN103992375A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 張玉;王偉;王君虹
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C07K5/072
• 分類號: C07K5/072;A61K38/05;A61P3/10
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別涉及一個能與α-葡萄糖苷酶結合，抑制其活性的二肽。

背景技術

血糖的主要來源之一是小腸對碳水化合物的消化吸收，淀粉等碳水化合物經α-葡萄糖苷酶分解成單糖，通過小腸吸收進入血液循環。因此α-葡萄糖苷酶在碳水化合物代謝生成葡萄糖中具有重要作用。α－葡萄糖苷酶抑制劑能通過抑制人體小腸上皮絨毛膜刷狀緣上α－葡萄糖苷酶的活性，延緩葡萄糖的生成，在降低餐后血糖中具有重要作用，目前α－葡萄糖苷酶抑制劑已廣泛應用于糖尿病治療中。

降血糖的藥物常見的有：

①α-葡萄糖苷酶抑制劑：阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇等。

②胰島素促進劑：瑞格列奈、那格列奈、格列美脲、格列喹酮等。

③胰島素增敏劑：二甲雙胍、噻唑烷二酮類等。

④胰島素及其類似物：胰島素、賴脯胰島素、門冬胰島素、賴谷胰島素等。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種具有降血糖功能的二肽QN及其用途。

為了解決上述技術問題，本發明提供一種二肽QN，該二肽QN的氨基酸序列為：Gln-Asn。

本發明還同時提供了上述二肽QN在制備降血糖藥物中的應用。

作為本發明的二肽QN的應用的改進：制備作為α-葡萄糖苷酶抑制肽的藥物。

本發明的二肽QN，能作為α-葡萄糖苷酶抑制肽。

本發明的二肽QN可通過委托吉爾生化(上海)有限公司合成獲得。

本發明所報道的二肽序列是針對α-葡萄糖苷酶具有抑制活性，從而表現出具有降血糖功能的特性。

本發明中所涉及的α-葡萄糖苷酶抑制活性的檢測方法：

分別取50μL一定濃度的多肽溶液(0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液配置)，100μL10mg/mL的α-葡萄糖苷酶溶液(用0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液配制)，加入酶標板中，混勻后，25℃下放置10min。然后加入50μL5mmol/L的PNPG(對硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷)溶液(用0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液配制)，37℃下培養30min后，加入50μL0.67mol/L的Na₂CO₃溶液終止反應，測定405nm下吸光度。該體系稱為樣品。

同時設置以下3個體系：對照、樣品空白、和對照空白。

對照：以50μL0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液替代50μL的多肽溶液。

樣品空白：以100μL的0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液代替100μL10mg/mL的α-葡萄糖苷酶溶液；

對照空白：分別以相應體積量的0.1mol/L，pH＝6.9磷酸緩沖液代替多肽溶液和α-葡萄糖苷酶溶液，抑制率按下式計算。

本發明的優點和積極效果：

該二肽分子可以抑制α-葡萄糖苷酶的活性。

依據本發明所述的氨基酸序列，可委托吉爾生化(上海)有限公司合成，從而獲得本發明所述的α-葡萄糖苷酶抑制肽(或簡稱為二肽QN)。

本發明的α-葡萄糖苷酶抑制肽(或簡稱為二肽QN)的用法和用量如下：

本發明的二肽為口服型，用量為口服，每次2g，每日2～3次。

具體實施方式

實施例1、

二肽QN在1.0mg/mL的濃度下的α-葡萄糖苷酶抑制活性：

檢測方法：將通過化學合成法獲得的此二肽QN，進行活性檢測(檢測方法同上)。此時QN濃度為1.0mg/mL。

結果：二肽QN在1.0mg/mL時的α-葡萄糖苷酶抑制活性為31.8％。

實施例2、

二肽QN在2.0mg/mL的濃度下的α-葡萄糖苷酶抑制活性：

檢測方法：將通過化學合成法獲得的此二肽QN，進行活性檢測(檢測方法同上)。此時QN濃度為2.0mg/mL。

結果：二肽QN在2.0mg/mL時的α-葡萄糖苷酶抑制活性為58.5％。

通過實施例1和實施例2中的抑制濃度和活性數據，說明此二肽QN的活性與濃度存在量效關系，此二肽QN具有α-葡萄糖苷酶抑制活性未見報道，屬于新的具有α-葡萄糖苷酶抑制活性功能肽。

對比例1、二肽TA(檢測方法同上)

二肽TA在1.0mg/mL時的α-葡萄糖苷酶抑制活性為15.2％，在2.0mg/mL時的α-葡萄糖苷酶抑制活性為31.5％。