[發明專利]海洋來源寡聚古羅糖醛酸的應用

有效

• 申請號: 201410247731.6
• 申請日: 2014-06-05
• 公開（公告）號: CN104083395A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發明（設計）人: 續旭;史旭陽;周瑞;王青青;張晗雪;萬敏
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: A61K31/734
• 分類號: A61K31/734;A61K31/702;A61P29/00;A23L1/29
• 代理公司: 深圳市恒申知識產權事務所(普通合伙) 44312
• 代理人: 陳健

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其涉及海洋來源寡聚古羅糖醛酸應用于制備抗炎藥物的應用。

背景技術

炎癥是一種極為常見且很重要的病理過程，已被證明與多種急性疾病和慢性疾病具有密切的聯系，如肥胖癥、糖尿病、動脈粥樣硬化、高血壓、中風、腫瘤、多囊卵巢綜合癥、老年癡呆癥等。抗炎療法是免疫療法中備受關注的研究熱點之一，寡糖已被證明具有抗腫瘤、抗炎、增強免疫作用等多種重要的生物學活性。近年來，隨著寡糖結構測定和生物活性研究取得明顯的進展，寡糖及糖復合物的研究在國際上引起了日益廣泛的重視。

褐藻酸鈉經過稀鹽酸、褐藻膠裂解酶、雙氧水降解分別得到酸解、酶解、氧化降解的寡聚物。酶解寡糖具有抗腫瘤、抗炎、增強免疫作用等多種重要的生物學活性，但是關于氧化降解的寡聚物的活性報道較少，目前尚沒有關于海洋來源寡聚古羅糖醛酸抗炎作用方面的報道。

發明內容

本發明旨在提供一種海洋來源的寡聚古羅糖醛酸的應用，將所述海洋來源寡聚古羅糖醛酸應用于制備抗炎藥物；所述海洋來源寡聚古羅糖醛酸的結構式為：其中，n為1、2、3、4、5或6。

本發明發現褐藻酸鈉氧化降解產物MdOA可以有效抑制LPS誘導的炎癥細胞模型生成過量NO及iNOS、COX-2的過量表達，還能抑制相關炎癥細胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的過量生成，說明了MdOA具有良好的抗炎活性，可應用于制備抗炎藥物或者保健食品。

附圖說明

圖1A是本發明實施例1中MdOA的細胞活力實驗檢測結果圖；

圖1B是本發明實施例1中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞生成NO的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖2A是本發明實施例2中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達iNOS?mRNA的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖2B是本發明實施例2中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達iNOS蛋白的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖3A是本發明實施例3中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達COX-2mRNA的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖3B是本發明實施例3中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達COX-2蛋白的濃度梯度實驗檢測結果圖。

圖4A是本發明實施例4中MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達炎癥細胞因子TNF-α的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖4B是本發明實施例4MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達炎癥細胞因子IL-1β的濃度梯度實驗檢測結果圖；

圖4C是本發明實施例4MdOA抑制LPS誘導的RAW264.7細胞表達炎癥細胞因子IL-6的濃度梯度實驗檢測結果圖。

具體實施方式

為了使本發明所要解決的技術問題、技術方案及有益效果更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。

NO是體內重要的生理遞質、細胞內外信息傳遞的化學信使，它參與機體生理過程的調節和宿主防御及免疫反應。很多疾病發生時，NO的含量是增加的，并通過增加局部血流促進血漿的滲出及水腫的形成，NO在炎癥反應中發揮了復雜作用。通過對藥物抑制LPS誘導的炎癥細胞模型產生的過量NO及過量表達的iNOS、COX-2的mRNA和蛋白的研究，可揭示藥物的抗炎活性。炎癥的發生都伴隨著炎癥因子的大量釋放，故而細胞內炎癥因子的含量可直接反應細胞炎癥的水平，本發明通過檢測腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)三種與炎癥的發生發展息息相關的重要炎癥因子，反應細胞內的炎癥水平，從而反應藥物的抗炎活性。

以下結合具體實施例對本發明作進一步說明。

實驗原料以及相關試劑

褐藻酸鈉購于上海諾泰化工有限公司；雙氧水購于西隴化工股份有限公司；RPMI1640培養基、胎牛血清購于美國Hyclone公司；細胞裂解液(RIPA)購于上海博彩生物科技公司；iNOS單克隆抗體、COX-2單克隆抗體購于德國CST公司；反轉錄試劑盒購于日本Takara公司；總RNA提取試劑盒購于上海飛捷生物技術有限公司；TNF-α、IL-6、IL-1β的ELISA試劑盒購于欣博盛生物公司；顯影液、定影液購于日本富士公司；青霉素、鏈霉素、LPS購于美國Sigma公司；所使用試劑及設備如無特別說明均可以從商業途徑獲得。

海洋來源寡聚古羅糖醛酸的制備