[發明專利]蕨類植物綠色球狀體60Co r射線輻射誘變方法

有效

• 申請號: 201410247680.7
• 申請日: 2014-06-05
• 公開（公告）號: CN103975861A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 葉曉青;佘建明;鄧衍明;賈新平;梁麗建;孫曉波
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

技術領域

本發明蕨類植物綠色球狀體⁶⁰Cor射線輻射誘變方法，涉及一種適用于植物組織培養和⁶⁰Cor射線輻射誘變技術，屬于植物培養方法技術領域。?

背景技術

蕨類植物也稱羊齒植物，起源于古生代志留紀和泥盆紀的裸蕨。蕨類植物的分類地位介于苔蘚植物和種子植物之間，目前全世界約有12000多種，主要分布在熱帶和亞熱帶地區，中國有2600多種(秦仁昌，1959，中國植物志(第二卷).北京：科學出版社)。蕨類植物的繁殖方式分為有性繁殖(孢子繁殖)、無性繁殖(營養繁殖)和組織培養，育種方法為引種馴化(韓敬，趙莉.蕨類植物繁殖研究進展[J].安徽農業科學，2005,33(7):1261～1263)。?

輻射誘變已成為觀賞植物品種培育和改良中一種非常重要的方法和手段。據Ahloowalia等報道，全世界在營養繁殖植物中已培育出465個突變品種，其中大部分是觀賞植物。通過輻射育種，我國近年來從菊花、月季、美人蕉、小蒼蘭、水仙、梅花、香石竹、豆瓣綠、花葉芋、百合、蝴蝶蘭、唐菖蒲等中獲得一些優良的突變品種(馬爽，李文建，周利斌，等.觀賞植物誘變育種的研究現狀和展望[J].核農學報,2007,21(4):378～382)。觀賞植物輻照處理材料，包括球莖、鱗莖、插條、種子、叢芽、原球莖、植株、盆栽苗等，經組織培養產生的愈傷組織、胚狀體、組培苗也可用于輻射處理(王丹，任少雄，蘇軍，等.核技術在觀賞植物誘變育種上的應用[J].核農學報,2004,18(6):443～447)。?

在蕨類植物上利用外植體誘導出綠色球狀體(greenglobularbodies，簡稱GGB)，類似于蘭花的原球莖，綠色球狀體經過培養獲得完整的幼小植物個體(陸樹剛，張光飛，蘇文華，等.蕨類植物學[M].北京:高等教育出版社,2007:33～37)。蕨類植物綠色球狀體尚未見用于輻射誘變的相關報道。?

有關原球莖⁶⁰Coγ射線半致死量的報道，蝴蝶蘭原球莖的半致死量分別為150Gy劑量(孫振雷主編.觀賞植物育種學[M].北京:民族出版社,1999,12:118～127)和50～68Gy(張相鋒，任艷麗，尚天翠，等.⁶⁰Coγ射線輻照對蝴蝶蘭原?球莖生長的影響[J].北方園藝,2009(3):177～180)。?

發明內容

技術問題本發明要解決的技術問題和提出的技術任務是：以蕨類植物離體培養誘導產生的綠色球狀體為材料，以⁶⁰Cor射線為輻射源，研究不同劑量的?⁶⁰Cor射線對綠色球狀體成苗的影響，應用組織培養和輻射誘變相結合的方法獲得突變體，建立蕨類植物綠色球狀體⁶⁰Cor射線輻射誘變育種技術。?

技術方案?

蕨類植物綠色球狀體⁶⁰Cor射線輻射誘變方法，包括：?

1)材料?

以蕨類植物無菌苗誘導產生的綠色球狀體為輻射處理材料，⁶⁰Cor射線為輻射源；?

2)培養基?

基本培養基由MS大量元素、MS微量元素與B₅維生素組成，添加蔗糖30g/L；?

綠色球狀體誘導和增殖培養基：附加6-芐基氨基嘌呤0.5mg/L和吲哚丁酸IBA0.1mg/L；?

綠色球狀體成苗培養基：附加吲哚丁酸IBA0.2mg/L，活性炭質量比0.1％；?

上述培養基在高壓滅菌前用氫氧化鈉和鹽酸調整pH值至5.8；?

3)方法?

將1)蕨類植物無菌苗接種到2)誘導培養基上，在無菌苗基部誘導產生綠色球狀體；綠色球狀體在2)增殖培養基上進行增殖培養后進行輻射處理,⁶⁰Cor射線的輻照劑量是80Gy或100～120Gy；經過輻射誘變處理的綠色球狀體轉移到2)成苗培養基上，在光照條件下培養，30d左右萌發產生綠芽；綠芽轉移到2)新鮮的成苗培養基上，30d左右形成具有根、莖、葉的完整小植株；?

離體培養條件：培養室溫度為26±2℃，光照強度為1500lx，光照時間為12h/d。綠色球狀體增殖和成苗培養均在光照條件下進行。?

所述蕨類植物為扇蕨或鳳尾蕨。?

有益效果本發明與現有技術相比具有如下優點和積極效果：?