[發明專利]一種提高液體酶穩定性的組合物

有效

• 申請號: 201410246814.3
• 申請日: 2014-06-05
• 公開（公告）號: CN103981168A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 王鳳超;王海;徐雪梅;占志平
• 申請（專利權）人: 青島蔚藍生物集團有限公司
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96;C12N9/42;C12N9/20
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

技術領域

本發明屬于酶制劑技術領域，具體涉及一種提高液體酶穩定性的組合物及其應用方法。

背景技術

隨著生物科技的不斷發展，酶制劑在工業、食品及飼料行業中的應用越來越廣泛。其中液體酶是酶制劑的主要劑型，其占有的市場份額不斷擴大。酶是一種具有生物活性的蛋白質，只有維持其特定的空間結構，才能具有活性。而酶的三維結構是由疏水作用、靜電作用、氫鍵及二硫鍵維持的，在液體狀態下酶分子處于舒展的狀態，活性中心裸露，很容易受化學、物理和生物等因素的影響，發生氧化、水解等反應而使酶分子的空間結構改變，失去活性，造成酶蛋白的聚集沉淀，既導致產品酶活下降，也影響產品外觀，從而限制了液體酶制劑的市場推廣。

目前市售的大多數液體酶制劑產品主要采用如下方法來解決穩定性的問題：1)通過對酶蛋白分子進行一定的化學修飾提高其穩定性，例如：利用一些小分子物質(糖類、多羥基醇類等)與酶蛋白分子表面的-NH、-OH或-COOH等基團發生反應，改變側鏈的結構，防止氧化、水解等反應的發生，從而提高酶分子的穩定性；2)選擇合適種類的穩定劑及合適的濃度提高酶的穩定性，能夠提供適宜的滲透壓，使酶分子處于相對脫水的狀態，多為無機鹽類或多羥基醇類；3)確定液體酶的最適pH范圍，pH是影響液體酶穩定性的關鍵因素之一。

目前市售的液體酶制劑產品多數在6個月內較穩定，但儲存期限超過6個月后，酶活降低得很快，嚴重限制了液體酶的推廣和使用。

發明內容

本發明為解決現有技術問題，提供了一種能夠提高液體酶穩定性的組合物及其應用方法，從而滿足液體酶長期儲存的需要。

本發明一方面提供了一種組合物，該組合物包含有丙二醇、蔗糖、麥芽糊精和氯化鈣；其中蔗糖和麥芽糊精占組合物總重量的15％-55％，蔗糖與麥芽糊精的質量比為1：2-4。

所述組合物，各組分及其占組合物總重量的百分比分別為：

所述組合物，各組分及其占組合物總重量的百分比分別為：

本發明另一方面提供了上述組合物在液體酶中的應用。

所述組合物在液體酶中的添加比例為0.15-0.35g/mL。

本發明提供的組合物能有效提高纖維素酶、木聚糖酶、脂肪酶等液體酶制劑的穩定性，使液體酶制劑在37℃條件下儲存8個月后，仍能保持80％以上的酶活，穩定性優于市售國外酶制劑產品。本發明所述組合物中各組分之間產生了協同促進作用，添加組合物的酶制劑的殘余酶活比單獨添加等量丙二醇、蔗糖、麥芽糊精或氯化鈣的酶制劑的最高殘余酶活還要高出10％-17％，取得了意料不到的技術效果。本發明所述組合物能有效延長液體酶制劑的儲存期限，因此有利于液體酶的推廣和使用。

具體實施方式

申請人在長期的研究中發現，蔗糖和麥芽糊精的含量對本發明所述組合物的穩定效果影響較大，在相同添加量的情況下，當組合物中蔗糖和麥芽糊精的含量在15％-55％的范圍內時，組合物對酶制劑的穩定效果明顯，當蔗糖和麥芽糊精的含量低于15％或高于55％時，酶制劑的殘余酶活顯著降低；且當蔗糖和麥芽糊精的質量比在1：2-4范圍內時，組合物的穩定效果最佳，尤其是蔗糖和麥芽糊精的質量比為1：3時，添加該組合物的酶制劑在相同條件下儲存8個月，殘余酶活仍高達85％以上，取得了意料不到的效果。

下面結合具體的實施方案對本發明進行更詳細的描述。但本發明并不受所述實施例的限制。提供實施方案的目的是為了使說明書全面而透徹，并向本領域的技術人員全面傳達發明的范圍。除另定義外，本發明所使用的所有技術和科學術語均具有作為本發明所屬技術領域中普通技術人員通常理解的同樣的含義。

本發明所用儀器設備為行業內常用設備，所用原料和試劑可選自市售任意一種，例如：丙二醇、蔗糖、麥芽糊精和氯化鈣均可選購自國藥集團；實施例4所述市售國外的纖維素酶、木聚糖酶和脂肪酶產品均可購自杰能科生物工程有限公司。

實施例1

一種組合物，各組分及其占組合物總重量的百分比分別為：

將上述的各個組分混合均勻制成組合物。

實施例2

一種組合物，各組分及其占組合物總重量的百分比分別為：

實施例3

一種組合物，各組分及其占組合物總重量的百分比分別為：

實施例4液體酶制劑穩定性測試

將上述組合物按0.15-0.35g/mL比例添加到液體酶(未添加穩定劑)中。