[發明專利]一種微生物厭氧降解染料的高通量無損檢測方法有效
| 申請號： | 201410243620.8 | 申請日： | 2014-06-04 |
| 公開（公告）號： | CN104046677A | 公開（公告）日： | 2014-09-17 |
| 發明（設計）人： | 肖翔;劉鵬程;雷育斌;朱雯雯;牛佳麗;杜道林 | 申請（專利權）人： | 江蘇大學 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 樓高潮 |
| 地址： | 212013 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 微生物 降解 染料 通量 無損 檢測 方法 | ||
【權利要求書】：
1.微生物厭氧降解的高通量無損檢測方法，其特征在于按照下述步驟進行：
（1）挑取待測微生物單克隆，接入50?ml酵母膏蛋白胨液體培養基，在好氧條件下于30?oC，180?rpm震蕩培養至對數后期；
（2）采用6000?×g，5?min離心收集菌體，之后用無菌蒸餾水重懸洗滌兩次；
（3）將步驟（2）離心重懸好的菌體密度調節到4~5×108?CFU/ml備用；
（4）將干凈的96孔板置于超凈臺中，紫外滅菌兩小時，備用；
（5）配制含有染料污染物的脫色培養基，并通入高純氮氣除氧；
（6）在無氧氛圍中，將步驟（5）所配含有染料污染物的培養基添加到步驟（4）處理好的96孔板，每孔加入80?μl培養基；
（7）再添加步驟（3）所調好菌濃的菌懸液60?μl于培養基中，在酶標儀上震蕩混勻；
（8）再向步驟（7）體系中加入60?μL液體石蠟，以防止液體蒸騰并在一定程度上隔絕空氣；
（9）加樣完成后在無氧氛圍中用高透光率透明膠帶密封，確保反應體系能隔絕空氣，形成高通量厭氧反應體系；
（10）將步驟（9）構建完成的96孔板降解體系于30?oC培養，用全波長酶標儀在特定波長下檢測待測染料的吸光值，進行定時無損監測。
2.根據權利要求1所述的微生物厭氧降解的高通量無損檢測方法，其特征在于LB培養基中含酵母提取物5?g/l、蛋白胨10?g/l、NaCl?l0?g/l。
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