[發(fā)明專利]制備麥角硫因的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410243400.5
• 申請日: 2014-05-30
• 公開（公告）號: CN105296559B
• 公開（公告）日: 2020-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姜文俠;劉琦;梅保良;張維亞
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;C12R1/645
• 代理公司: 11322 北京尚誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 龍淳

本發(fā)明涉及改進(jìn)的制備麥角硫因的方法，該方法包括如下步驟：(a)將糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatus)CGMCC No.6232的菌種接種至種子培養(yǎng)基，培養(yǎng)制備種子液，其中所述種子培養(yǎng)基使用豆餅粉作為氮源；和(b)將種子液接種至發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基，然后培養(yǎng)得到糙皮側(cè)耳菌絲體發(fā)酵液。進(jìn)一步，向發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加以下的任一種或多種物質(zhì)：NH₄Cl、NH₄NO₃、葉酸、維生素B1(VB1)、吲哚丁酸、檸檬酸、丙酮酸、谷氨酸、天冬氨酸、甜菜堿、組氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、吐溫和司盤。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物資源、生物工程、發(fā)酵工程及天然產(chǎn)物的生物合成領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種以更高的產(chǎn)量制備麥角硫因的方法。

背景技術(shù)

麥角硫因(L-Ergothioneine，EGT)是一種稀有的天然手性氨基酸，作為生物體內(nèi)重要的生理活性物質(zhì)，起著抗氧化，防止紫外輻射損傷，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的氧化還原反應(yīng)，螯合二價金屬離子，參與細(xì)胞內(nèi)的能量調(diào)節(jié)等諸多生物學(xué)功能，是一種多功能的細(xì)胞生理保護(hù)劑(劉琦，姜文俠，楊萍，周濤.麥角硫因——多功能的生理細(xì)胞保護(hù)劑[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2013，25(增刊)：160-164)。麥角硫因是通常認(rèn)為安全的(generally recognized assafe，GRAS)產(chǎn)品，性能穩(wěn)定，在醫(yī)藥、生物醫(yī)學(xué)、食品、保健食品、食品添加劑和化妝品等行業(yè)具有重要的應(yīng)用價值和廣闊的應(yīng)用前景。

由于目前麥角硫因的制備成本高，限制了其應(yīng)用。與化學(xué)合成法和天然生物提取法相比，利用食用菌深層發(fā)酵制備麥角硫因，可以通過建立高強(qiáng)度發(fā)酵過程控制策略，提高麥角硫因的積累量，實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的高效生產(chǎn)，降低生產(chǎn)成本，而且具有產(chǎn)品安全等優(yōu)勢，是合成麥角硫因的發(fā)展方向(劉琦，張維亞，姜文俠，梅保良，周濤.麥角硫因生物合成技術(shù)的研究進(jìn)展[C].2013年國際氨基酸產(chǎn)業(yè)發(fā)展高峰論壇論文集.2013：22-27)。

日本Pramvadee Tepwong等利用香菇(Lentinula edodes)菌絲體深層發(fā)酵制備麥角硫因，發(fā)酵第15天時發(fā)酵液中麥角硫因的產(chǎn)量為23.6mg/L(Pramvadee Tepwong,AnupamGiri,Fumito Sasaki.Mycobial enhancement of ergothioneine by submergedcultivation of edible mushroom mycelia and its application as anantioxidative compound[J].Food Chemistry,2012,131:247–258)；韓國Wi Young Lee等利用紫黑靈芝(Ganoderma neo-japonicum)菌絲體發(fā)酵合成麥角硫因，發(fā)酵結(jié)束時發(fā)酵液中麥角硫因的含量達(dá)57.5mg/L(Wi Young Lee,Eung-Jun Park,Jin KwonAhn.Supplementation of methionine enhanced the ergothioneine accumulation inthe Ganoderma neo-japonicum mycelia[J].Appl Biochem Biotechnol,2009,158:213-221)；臺灣黃齡誼和Chih-Hung Liang對杏鮑菇(Pleurotus eryngii)菌絲體進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)酵液中麥角硫因的產(chǎn)量分別達(dá)62.2mg/L(黃齡誼.高麥角硫因含量之杏鮑菇菌絲體深層培養(yǎng)及其生理活性[D].臺灣：中興大學(xué)，2010)和60.4mg/L(Chih-HungLiang,Ling-Yi Huang,Kung-Jui Ho,et al.Submerged cultivation of mycelium withhigh ergothioneine content from the culinary-medicinal king oyster mushroomPleurotus eryngii(higher basidiomycetes)and its composition[J].InternationalJournal of Medicinal Mushrooms,2013,15(2):153-164)；姜文俠等利用糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatus)菌絲體發(fā)酵制備麥角硫因，通過對發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵控制工藝的優(yōu)化，發(fā)酵液中麥角硫因的含量達(dá)到135.7mg/L(姜文俠，劉琦，周濤.生產(chǎn)麥角硫因的菌株及制備麥角硫因的方法[P].CN201210392417.8)。