[發(fā)明專利]一種水培方式生產(chǎn)甘薯脫毒種苗的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410242577.3
• 申請(qǐng)日: 2014-06-03
• 公開（公告）號(hào): CN103960134A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程群;徐怡;瞿勇;李衛(wèi)東;沈艷芬;向極釬;郭光耀;陳家吉;陳巧玲;朱云芬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種水培方式生產(chǎn)甘薯脫毒種苗的方法，其特征在于包括如下步驟：a.外植體處理：將選取的薯塊在溫室育苗,選取莖頂端長(zhǎng)芽段,用自來(lái)水沖洗，經(jīng)消毒處理；b.莖尖分生組織培養(yǎng)：在工作臺(tái)上剝離莖尖,接種到MS加激素的培養(yǎng)基試管中培養(yǎng)，莖尖愈傷組織形成,轉(zhuǎn)入廣口瓶MS培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)幼苗長(zhǎng)出時(shí),進(jìn)行病毒檢測(cè)；c.組培莖尖苗病毒檢測(cè)：組培莖尖苗經(jīng)過病毒檢測(cè),確認(rèn)為無(wú)毒苗；d.試管苗繼代增殖培養(yǎng)：經(jīng)過病毒檢測(cè)確信無(wú)病毒的試管苗，在無(wú)菌條件下將無(wú)毒苗切段，移入裝有MS培養(yǎng)基的廣口瓶中培養(yǎng)，經(jīng)腋芽萌發(fā)，長(zhǎng)成苗；e.溫室消毒：為防甘薯水培苗在生產(chǎn)過程中被病毒再浸染，溫室經(jīng)過消毒，先對(duì)整個(gè)溫室進(jìn)行熏蒸，再進(jìn)行培養(yǎng)盤消毒；f.煉苗：篩選生根好、生長(zhǎng)健壯的甘薯脫毒組培苗放在經(jīng)過消毒的防蟲溫室，煉苗；g.誘導(dǎo)根原始體形成：將煉苗后的脫毒組培苗從組培瓶中取出，保留原有根系，再將組培苗栽于水培盤中的泡沫板上，水培盤中加入誘導(dǎo)根原始體形成的營(yíng)養(yǎng)液；h.水培苗生根培養(yǎng)：將栽好的水培苗置于溫室中，出現(xiàn)根原始體后，將誘導(dǎo)根原始體的營(yíng)養(yǎng)液換成生根營(yíng)養(yǎng)液；i.水培苗生長(zhǎng)培養(yǎng)：將栽好的水培苗置于溫室中水培苗，將生根營(yíng)養(yǎng)液換成繼代增殖生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液；j.水培苗增殖擴(kuò)繁：水培苗在防蟲溫室培養(yǎng)，水培苗剪成2葉節(jié)扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：脫毒苗移栽到蛭石或珍珠巖基質(zhì)中。

2.按照權(quán)利要求1所述的一種水培方式生產(chǎn)甘薯脫毒種苗的方法，其特征在于包括如下步驟：a.外植體處理：選擇適宜本地區(qū)大面積推廣的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)或有特殊用途的優(yōu)良甘薯品種，將選取的薯塊在溫室育苗,當(dāng)苗高20cm,選取莖頂端2cm長(zhǎng)芽段,剪去肉眼可見葉片,用自來(lái)水沖洗，經(jīng)70％酒精浸泡，再用0.1％升汞溶液消毒，5％次氯酸鈉溶液消毒處理,無(wú)菌水沖洗3遍；b.莖尖分生組織培養(yǎng)：在超凈工作臺(tái)上體視顯微鏡下剝離0.2-0.4mm的莖尖,接種到MS加激素的培養(yǎng)基試管中，在溫度28℃條件下培養(yǎng)，25天后莖尖愈傷組織形成,轉(zhuǎn)入廣口瓶MS培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)50-60天，當(dāng)幼苗長(zhǎng)出5-7片葉時(shí),進(jìn)行病毒檢測(cè)；c.組培莖尖苗病毒檢測(cè)：組培莖尖苗經(jīng)過病毒檢測(cè),才能確認(rèn)為無(wú)毒苗,病毒檢測(cè)用癥狀學(xué)診斷法和指示植物檢測(cè)法,先用癥狀學(xué)診斷法全面觀察組培莖尖苗的長(zhǎng)勢(shì)長(zhǎng)相,將長(zhǎng)勢(shì)弱,葉片黃化、黃脈和花葉等癥狀明顯的帶毒苗淘汰去除,再用指示植物檢測(cè)法將生長(zhǎng)可疑的莖尖苗嫁接在巴西牽牛上,15d后觀察結(jié)果,如有明脈、褪綠斑、花葉等癥狀,即為帶毒苗,淘汰去除,一般需要重復(fù)嫁接2次,未顯癥狀者,可確認(rèn)為無(wú)毒苗；d.試管苗繼代增殖培養(yǎng)：經(jīng)過病毒檢測(cè)確信無(wú)病毒的試管苗，在無(wú)菌條件下將5-7葉的無(wú)毒苗1葉1節(jié)切段，移入裝有MS培養(yǎng)基的廣口瓶中培養(yǎng)，在溫度28℃條件下培養(yǎng)，經(jīng)3-5天腋芽萌發(fā)，30d后長(zhǎng)成5-7片葉的成苗，不斷切段增殖培養(yǎng)，繁殖系數(shù)為3-5倍；e.溫室消毒：為防甘薯水培苗在生產(chǎn)過程中被病毒再浸染，溫室經(jīng)過消毒，產(chǎn)品選用二氧化氯消毒劑，先對(duì)整個(gè)溫室進(jìn)行熏蒸，熏蒸一個(gè)星期后，再進(jìn)行培養(yǎng)盤消毒；f.煉苗：篩選生根好、生長(zhǎng)健壯的甘薯脫毒組培苗放在經(jīng)過消毒的防蟲溫室，于室溫、自然光下煉苗2-3天；g.誘導(dǎo)根原始體形成：將煉苗后的脫毒組培苗從組培瓶中取出，剪掉部分根系，保留原有根系2-3cm，用純凈水沖洗掉殘留培養(yǎng)基，再將組培苗栽于水培盤中的泡沫板上，水培盤中加入誘導(dǎo)根原始體形成的營(yíng)養(yǎng)液；h.水培苗生根培養(yǎng)：將栽好的水培苗置于溫度26±2℃溫室中，自然光散射，5-7天出現(xiàn)根原始體后，將誘導(dǎo)根原始體的營(yíng)養(yǎng)液換成生根營(yíng)養(yǎng)液；i.水培苗生長(zhǎng)培養(yǎng)：將栽好的水培苗置于溫度26±2℃溫室中，自然光散射，7-10天，水培苗根系長(zhǎng)度達(dá)到2-3cm時(shí)，將生根營(yíng)養(yǎng)液換成繼代增殖生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)液；j.水培苗增殖擴(kuò)繁：水培苗在防蟲溫室培養(yǎng)11-13天，水培苗長(zhǎng)到15-18cm時(shí)，可以剪成2葉節(jié)扦插，以苗繁苗；k.水培移栽：當(dāng)脫毒苗長(zhǎng)到12-15cm時(shí)，移栽到蛭石或珍珠巖基質(zhì)中。