[發(fā)明專利]預(yù)測晚期非小細胞肺癌含鉑化療療效及生存期的分子標(biāo)記及試劑盒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410240846.2
• 申請日: 2014-06-02
• 公開（公告）號: CN104017874A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 盧大儒;陳紅巖;王詩銘
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;盛志范

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)分子遺傳學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種預(yù)測晚期非小細胞肺癌接受含鉑化療后臨床獲益率及無疾病進展生存期的分子標(biāo)記及試劑盒。

背景技術(shù)

惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命健康的殺手之一，而肺癌是發(fā)病率最高、死亡率最高的惡性腫瘤，最常見的肺癌類型為非小細胞肺癌（Non-small?cell?lung?cancer,?NSCLC），約占全部肺癌患者的80%左右，大部分非小細胞肺癌患者在確診時已經(jīng)處于晚期，不再適合手術(shù)治療，因此以化療為主的綜合治療成為了晚期非小細胞肺癌的標(biāo)準(zhǔn)治療，而含鉑化療因具有較強的抗腫瘤效果而廣泛應(yīng)用于臨床治療晚期非小細胞肺癌。目前，含鉑化療在臨床治療晚期非小細胞肺癌中取得了顯著效果：有效率達到30%，中位生存期8~10個月，2年生存率約10%~15%。然而，不同個體在臨床治療中對含鉑化療表現(xiàn)出顯著不同的敏感性。因此，深入研究影響晚期非小細胞肺癌化療療效相關(guān)因素，提高臨床治療效率，具有重要的臨床意義。以此為理論依據(jù)，為肺癌個體化醫(yī)療提供基礎(chǔ)，是當(dāng)今肺癌個性化醫(yī)療研究領(lǐng)域的熱點和難點。

隨著分子生物學(xué)技術(shù)與基因組學(xué)的不斷發(fā)展，肺癌個體化醫(yī)療研究已經(jīng)由傳統(tǒng)的體外藥敏實驗研究方法，發(fā)展為基于基因組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)基礎(chǔ)研究的高通量篩選腫瘤化療分子標(biāo)志物的研究方法，包括腫瘤組織表達譜、DNA甲基化、miRNA、單核苷酸多態(tài)性（Single?nucleotide?polymorphism,?SNP）等。隨著高通量技術(shù)的不斷發(fā)展，基于普遍性存在且具有特異性的SNP逐步成為個體化醫(yī)療中最為廣泛應(yīng)用的生物遺傳分子標(biāo)記物。從腫瘤化療療效評估來看，雖然化療療效與腫瘤組織基因組、轉(zhuǎn)錄組及蛋白表達量的變化最為相關(guān)，但大多數(shù)晚期非小細胞肺癌患者已經(jīng)不適合手術(shù)，獲得腫瘤組織十分不易，故常用比較容易獲得的外周血進行外周血基因組SNP多態(tài)性檢測來探索化療療效與遺傳因素的相關(guān)性。因此，通過外周血基因組DNA檢測SNP多態(tài)性成為了臨床評估肺癌化療療效的最常用研究方法。

mTOR（mammalian?target?of?rapamycin,?mTOR）信號通路在細胞生存、細胞生長及增殖起著關(guān)鍵的調(diào)控作用，與細胞凋亡及自噬、蛋白質(zhì)合成、免疫、細胞運動及代謝等有著密切的關(guān)系。研究表明，mTOR信號通路異常與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，且與藥物敏感性有著密不可分的關(guān)系。RICTOR基因編碼的RICTOR蛋白是mTOR通路中mTORC2復(fù)合體的成分之一，研究表明，mTORC2復(fù)合體參與細胞骨架形成，RICTOR作為mTORC2的主成分之一在腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移中起著十分關(guān)鍵的作用，且RICTOR參與Akt的完全活化從而影響Akt通路下游調(diào)節(jié)子的功能，進而調(diào)節(jié)Akt通路在細胞凋亡中的功能。

本發(fā)明研究了RICTOR基因的多態(tài)性位點與晚期非小細胞肺癌患者接受含鉑化療后的臨床獲益率及無疾病進展生存期的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)一個該基因的一個單核苷酸多態(tài)性與含鉑化療臨床獲益率及無疾病進展生存期顯著相關(guān)，該分子標(biāo)記可應(yīng)用于預(yù)測晚期非小細胞肺癌患者含鉑化療預(yù)后情況，為此類病人的個體化醫(yī)療提供依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可應(yīng)用于臨床預(yù)測晚期非小細胞肺癌患者含鉑化療預(yù)后（化療后臨床獲益率及無疾病進展生存期）的分子標(biāo)記及試劑盒。

本發(fā)明提供的預(yù)測晚期非小細胞肺癌患者含鉑化療預(yù)后的分子標(biāo)記，該預(yù)測功能可通過對患者外周血基因組DNA的分子標(biāo)記的檢測而實現(xiàn)。上述分子標(biāo)記包括與晚期非小細胞肺癌含鉑化療臨床獲益率及無疾病進展生存期相關(guān)的RICTOR基因及該基因上單核苷酸多態(tài)性位點rs6878291。

作為上述分子標(biāo)記的應(yīng)用，本發(fā)明還提供用以預(yù)測晚期非小細胞肺癌患者含鉑化療預(yù)后的RICTOR基因多態(tài)性檢測試劑盒。

該試劑盒包括：

（1）檢測RICTOR基因上rs6878291多態(tài)性位點基因型的特異性引物對，所述的特異性引物對是指針對RICTOR基因rs6878291多態(tài)性位點而設(shè)計，能特異性擴增出包含這個SNP位點的DNA片段的引物對，特異性引物對可用常規(guī)的合成技術(shù)進行合成。所述引物對可用如下序列：正向引物：5’-CCCATCACTCTTACCTAAACTCTC-3’（SEQ?ID?NO.1）；反向引物：5’-GACTGTGGTAGGCATTTGAAGATA-3’（SEQ?ID?NO.1）。