[發明專利]一種具有解磷能力的弗村假單胞菌及其應用

在審

• 申請號: 201410237364.1
• 申請日: 2014-05-30
• 公開（公告）號: CN104371946A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 朱曉麗;宋進喜;馬俊杰;李賀
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P21/00;C05F11/08;A01C1/00;A01C1/06;A01G7/06;A01C21/00;C12R1/38
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 謝鋼

1.一種具有解磷能力的菌株ZSW-3-5-1a，其分類命名為弗村假單胞菌（Pseudomonas?vranovensis），已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.8750。

2.含有權利要求1所述弗村假單胞菌ZSW-3-5-1a的微生物菌劑。

3.權利要求2所述微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：

1)菌種發酵

①將凍存的弗村假單胞菌ZSW-3-5-1a在37℃條件下快速解凍，按照0.5-1%的接種量接入裝有10-15ml液體培養基A的試管中，28-32℃，靜置培養8-12小時，得到ZSW-3-5-1a的一級種子液；

液體培養基A組成為：胰蛋白胨5?g，酵母粉?5?g，NaCl?10g，蒸餾水1000ml，pH值?7.2；

②二級三角瓶液體培養

將一級種子液按照3-5%的接種量接入裝有50-100ml液體培養基A的三角瓶中，28-32℃，150-200rpm培養8-12小時；

③發酵罐發酵

將ZSW-3-5-1a的一級培養液按照5-10%的接種量分別接入裝有發酵培養基E的發酵罐中，進行發酵培養，罐溫28-32℃，培養pH6.8-7.5，通氣培養48-72小時獲得菌懸液，即為液體解磷菌劑，有效活菌數可達2.1-5×10⁹?CFU/ml；

發酵培養基E組成為：葡萄糖10-15g，麩皮5-10g，豆粕30-50g?，玉米粉3-5g，(NH₄)SO₄?0.2-0.4g，KH₂PO₄?5-10g，K₂HPO₄?0.1-0.2g，KCl?0.2-0.5?g?，Ca₂(PO₄)₃?10-13?g，MgSO₄·7H₂O?0.25-0.5g?，MgCl₂·6H₂O?5-10g，水1000ml，pH?6.8~7.5；

2）將秸稈粉、草炭土、麩皮和豆粕粉碎過60目篩，按照質量比為20-30:20-30:5-10:30-50的比例均勻混合再加入30-50%的發酵培養基E，混合均勻后，用布袋或耐高溫塑料袋裝，1-1.5Kg/袋，0.1MPa滅菌2-3小時，取出冷卻即為發酵固態基質；

3）將步驟1）中得到的菌懸液按照100-200ml/kg的劑量與步驟2）中所得的發酵固態基質混勻，28-32℃發酵5-7天，即得到固體菌劑，菌體密度達到1-2×10⁹?CFU/g。

4.權利要求1所述弗村假單胞菌在促進植物生長中的應用。

5.權利要求2所述微生物菌劑的使用方法，其特征在于：液體菌劑在植物浸種或浸根時以100-500倍的液體菌劑稀釋液浸泡種子或植物根部2-5小時，育苗期或生長期灌根采用1000-5000倍的液體菌劑稀釋液10-40ml/Kg土壤劑量澆灌稀釋液，整個生長期灌根1-3次；固態菌劑作為基肥和追肥使用，使用劑量為5-15g/Kg土壤。