[發明專利]一種β-葡聚糖基因載體及其制備方法和應用無效
| 申請號： | 201410236401.7 | 申請日： | 2014-05-30 |
| 公開（公告）號： | CN103981201A | 公開（公告）日： | 2014-08-13 |
| 發明（設計）人： | 許小娟;劉青業;張俐娜 | 申請（專利權）人： | 武漢大學 |
| 主分類號： | C12N15/63 | 分類號： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 張火春 |
| 地址： | 430072 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 聚糖 基因 載體 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于包括如下步驟：
（1）將β-葡聚糖溶于磷酸鹽緩沖液中130-145℃下加熱15-60分鐘或溶于二甲基亞砜或強堿溶液中制得變性的單鏈多糖溶液；
（2）將poly(dA)n通過共價鍵與目標核苷酸鍵接并溶于pH?7-9緩沖液；
（3）將（1）得到的變性的單鏈多糖溶液加入到（2）得到的poly(dA)n-目標核苷酸/緩沖溶液中，混勻，靜置12-48小時，得到β-葡聚糖基因載體。
2.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（1）中所述的β-葡聚糖為三螺旋β-葡聚糖，其分子量為5.0×104-4.5×105。
3.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（1）中所述的強堿溶液的濃度＞0.1M。
4.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的poly(dA)n中n≥15。
5.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的目標核苷酸包括DNA和RNA。
6.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（3）中變性單鏈多糖的終濃度/核酸的終濃度≥8。
7.根據權利要求1所述的β-葡聚糖基因載體的制備方法，其特征在于：步驟（3）中靜置的溫度為4-37℃。
8.一種β-葡聚糖基因載體，其特征在于：通過權利要求1-7任一項所述的方法制備得到。
9.權利要求8所述的β-葡聚糖基因載體在DNA和RNA的轉載中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于：權利要求8所述的β-葡聚糖基因載體在CpG?DNA和siRNA的轉載中的應用。
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