[發明專利]一種細胞保存液

有效

• 申請號: 201410232820.3
• 申請日: 2014-05-23
• 公開（公告）號: CN104041484A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發明（設計）人: 張鷺鷺;李小磊;李先坤;程昀靜;郭利杰
• 申請（專利權）人: 科蒂亞（新鄉）生物技術有限公司
• 主分類號: A01N1/00
• 分類號: A01N1/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明涉及生物制劑技術領域；具體涉及一種細胞保存液。

背景技術

目前，正常人體活細胞在脫落前是具有生理學功能、生物學活性及完整的細胞形態，在生物學研究和醫學檢驗中具有重要的價值。若是離開人體，脫落的細胞其生理學功能、生物學活性及細胞形態結構也將發生改變。因此，如何有效保存脫落細胞形態和結構是細胞學檢測中需要考慮的問題。主要從傳統和常規上有以下幾種檢查方法：

在傳統的細胞學檢查方法巴氏涂片法(即宮頸刮片)制成的涂片，存在大量細胞重疊現象，并且存在一些無檢驗價值的雜細胞，這給病理結果帶來了一定的誤差。

而在常規的宮頸癌篩查中，有液基薄層細胞學、PCR、bDNA等技術方法。液基薄層細胞學檢查(英文簡稱TCT)是常用的技術手段之一，目前在歐美和我國的大中城市，越來越廣泛的應用于宮頸細胞學篩查中。TCT是一種現代化的宮頸細胞學涂片技術，通過采集人體宮頸表面的脫落細胞，經染色后用顯微鏡觀察這些細胞的形態和結構，并做出診斷。PCR和bDNA技術是采用宮頸上皮細胞分別進行DNA和RNA的檢測。但是從上述幾種方法中可以看出都是采用宮頸脫落細胞樣品進行檢測，因而細胞保存液是檢測前細胞保存的關鍵。目前，美國新柏氏(Thinprep?cytologic?test)細胞保存液是與其儀器(Thinpreper-2000)配套使用的專用試劑，但是價格昂貴，加重患者的治療成本。

因此，本發明是在主要解決目前現有技術存在以上不足的基礎上研發出來的。

發明內容

發明的目的是解決以上技術問題，特別提出一種降低成本、兼容性強、有效的對脫落細胞樣品進行固定保存的細胞保存液。

基于上述目的，本發明所解決的技術問題采用以下技術方案來實現：

一種細胞保存液，它由氯化鈉、乙二胺四乙酸二鈉、PEG10000、Proclin300、甲醇、醋酸-醋酸鈉緩沖液組成，按重量百分比計，其中

氯化鈉：0.12-0.14％?乙二胺四乙酸二鈉：0.05-0.42％

PEG10000：0.15-0.20％?Proclin300：0.01-0.20％

甲醇：10.0-45.0％????醋酸-醋酸鈉緩沖液：64.0-88.0％。

進一步，所述重量比為：

氯化鈉：0.12g???????乙二胺四乙酸二鈉：0.42g

PEG10000：0.15ml?????Proclin300：0.01ml

甲醇：10.0g?????????醋酸-醋酸鈉緩沖液：88.0ml。

本發明組分的技術原理:

氯化鈉：是一種滲透壓維持劑。

乙二胺四乙酸二鈉：是一種抗聚集試劑，能避免細胞堆積。

PEG10000：是一種非滲透性大分子物質，能保護細胞骨架的完整性，防止細胞水腫。

Proclin300：是一種防腐劑，能有效地殺滅樣品中的細菌、真菌、酵母菌等病原體，延長保存液的保存時間，同時能保護工作環境及工作人員健康。

甲醇：固定劑，能快速對樣品中的白細胞、上皮細胞等有檢驗價值的細胞進行固定保存，有效保存細胞形態完好，同時也可以維持細胞內核酸的完整性。

醋酸-醋酸鈉緩沖液：緩沖液PH4.4，可有效維持細胞形態特征。

本發明的有益效果是：1.該細胞保存液中包括ｐＨ緩沖劑、滲透壓維持劑，能有效保存細胞形態結構完整，無細胞溶解和細胞腫脹現象，該細胞保存液含有細胞固定劑成分，可有效快速對樣品中的上皮脫落細胞、白細胞等脫落細胞進行固定保存，防止細胞發生自溶。

2、該細胞保存液能有效降低核酸降解，易于后續核酸的檢測研究。

3、兼容性強：保存的細胞可同時進行免疫細胞化學、TCT、HPV-PCR、bDNA等分子生物技術檢測，無需多次采樣。

4、成分簡單、價格低廉、易于推廣。

5、使用簡單，操作方便，大大節省了制備樣品的時間。

具體實施方式

以下通過具體的實施方式，進一步闡述本發明。

一種細胞保存液，它由氯化鈉、乙二胺四乙酸二鈉、PEG10000、Proclin300、甲醇、醋酸-醋酸鈉緩沖液組成，按重量百分比計，其中

氯化鈉：0.12-0.14％?乙二胺四乙酸二鈉：0.05-0.42％；

PEG10000：0.15-0.20％?Proclin300：0.01-0.20％；