[發(fā)明專利]一種檢測(cè)鮭魚種類的方法及其檢測(cè)試劑盒和引物

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410231413.0
• 申請(qǐng)日: 2014-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN103966347A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 江文濤;黃臻輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海第一生化藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海弼興律師事務(wù)所 31283
• 代理人: 朱水平;沈利

1.一種檢測(cè)鮭魚種類的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)提取待檢測(cè)樣本的基因組DNA，以其為模板，以特異性擴(kuò)增引物對(duì)擴(kuò)增待檢測(cè)樣本的基因組DNA，所述特異性擴(kuò)增引物對(duì)的序列分別如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4，或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，或SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示，

(2)將步驟(1)所得PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳分析，有特異性條帶的待測(cè)樣本屬于大西洋鮭魚(Salmo salar)或大馬哈魚(Oncorhynchus keta)。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括步驟(3)，將步驟(1)所得PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果與鮭魚科的COI基因進(jìn)行序列比對(duì)，樣品基因序列與大西洋鮭魚(Salmo salar)或大馬哈魚(Oncorhynchus keta)的COI基因的匹配度≥99％，則確定待測(cè)樣本為大西洋鮭魚(Salmo salar)或大馬哈魚(Oncorhynchus keta)。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述PCR反應(yīng)中，PCR的反應(yīng)體系為：1×PCR反應(yīng)緩沖液，10～15mmol/L Mg²⁺，0.2～0.3mmol/L dNTP，0.1～0.3μM特異性擴(kuò)增引物對(duì)，Taq酶0.01～0.1U/μL，DNA模板10～100ng/μL。

4.一種檢測(cè)鮭魚種類的試劑盒，其特征在于，其包括特異性擴(kuò)增引物對(duì)，所述特異性擴(kuò)增引物對(duì)的序列分別如序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，或SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4，或SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，或SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，或SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示。

5.一種檢測(cè)鮭魚種類的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO:1所示或者如SEQ ID NO:2所示。

6.一種檢測(cè)鮭魚種類的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO:3所示或者如SEQ ID NO:4所示。

7.一種檢測(cè)鮭魚種類的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO:5所示或者如SEQ ID NO:6所示。

8.一種檢測(cè)鮭魚種類的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO:7所示或者如SEQ ID NO:8所示。

9.一種檢測(cè)鮭魚種類的引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO:9所示或者如SEQ ID NO:10所示。