[發明專利]用于特異性動物毛皮屑過敏原IgE篩查的試紙條及其制備方法

有效

• 申請號: 201410231215.4
• 申請日: 2014-05-28
• 公開（公告）號: CN103995112A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 蔣琳
• 申請（專利權）人: 中生北控生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種用于特異性動物毛皮屑過敏原IgE篩查的試紙條，其特征在于，所述試紙條包被有膠體金標記的動物毛皮屑抗原。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述試紙條為包被有膠體金標記的動物毛皮屑抗原的硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜。

3.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述試紙條的pH值為8.5-10，膠體金顆粒與動物毛皮屑抗原之間的摩爾比為5-20:1。

4.根據權利要求1-3任一項所述的試紙條，其特征在于，動物毛皮屑包括但不限于貓毛皮屑、狗毛皮屑、羊毛皮屑、駝毛皮屑、兔毛皮屑、馬毛皮屑、豬毛皮屑、牛毛皮屑。

5.根據權利要求4所述的試紙條，其特征在于，所述動物毛皮屑抗原為貓毛皮屑抗原；所述貓毛皮屑抗原的制備方法為：取貓毛皮屑50g，加入水100g，凍干后用組織粉碎機粉碎，2000r/min離心，取沉淀物，加入200mL丙酮分析純進行脫脂處理，重復脫脂5次以上，每次脫脂結束后進行離心，離心后的物質置于通風櫥中，將殘余的丙酮揮發完全，粉碎后再次脫脂，即得貓毛皮屑抗原。

6.權利要求1-5任一項所述試紙條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)動物毛皮屑抗原溶液的制備：將待標記的動物毛皮屑抗原溶解在0.9％pH7.0的NaCl溶液中，使其終濃度為50-500μg/ml，即得動物毛皮屑抗原溶液；

2)膠體金溶液的制備：用0.1M?K₂CO₃溶液和0.1M?HCl調0.01％HAuCl₄膠體金溶液的pH值至8.5-10，使膠體金的粒徑達到40-60nm，濃度達到0.5-2％，即得膠體金溶液；

3)膠體金與動物毛皮屑抗原的結合：用0.1M?K₂CO₃溶液調步驟1)的抗原溶液的pH值至8.5-10，邊攪拌邊向其中加入步驟2)的膠體金溶液，抗原溶液與膠體金溶液的體積比為1-10:100，同時加入穩定劑以防止動物毛皮屑抗原與膠體金顆粒聚合沉淀，即得膠體金-動物毛皮屑抗原結合物；所述穩定劑為BSA和分子量20KD的聚乙二醇，二者終濃度分別為1％和0.1％；

4)膠體金標記的動物毛皮屑抗原的純化：將步驟3)中制備的膠體金-動物毛皮屑抗原結合物經1500r/min離心20min；收集沉淀溶于穩定劑中，使其濃度達到5-30％；然后加至Sephacryl?S-400層析柱上進行純化，將純化的膠體金標記的動物毛皮屑抗原溶液過濾除菌，4℃保存；所述穩定劑為1％BSA和0.1％分子量20KD的聚乙二醇溶液；

5)試紙條的包被：將步驟4)中制備的膠體金標記的動物毛皮屑抗原溶液噴線于試紙條上，干燥后即得用于特異性動物毛皮屑過敏原IgE篩查的試紙條成品。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟4)中加樣量為Sephacryl?S-400層析柱體積的1/10，以穩定劑作為洗脫液，流速為5-10ml/h；所述穩定劑為1％BSA和0.1％分子量20KD的聚乙二醇溶液。