[發明專利]利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測方法

有效

• 申請號: 201410229096.9
• 申請日: 2014-05-28
• 公開（公告）號: CN104133053A
• 公開（公告）日: 2014-11-05
• 發明（設計）人: 何丹農;顏娟;宋世平;樊春海
• 申請（專利權）人: 上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48;C12Q1/68
• 代理公司: 上海東方易知識產權事務所 31121
• 代理人: 唐莉莎

1.一種利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，將生物素分子通過折紙的過程嵌入到DNA納米結構上，所制備的產物為含有多生物素活性位點的DNA納米結構，此結構可作為信號放大探針應用于生物檢測領域中，從而實現抗原、抗體、蛋白質、DNA、RNA、多肽、細胞等目標物的高靈敏度檢測。

2.根據權利要求1所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述的DNA納米結構由DNA通過自組裝、延伸、折疊等技術構成的一類納米結構，組成此結構的單鏈DNA，可經過如巰基、或生物素、或氨基修飾。

3.根據權利要求1所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，包括以下幾個步驟：

（1）長鏈DNA溶液中，加入訂書釘鏈DNA，混合均勻后由高溫緩慢降至室溫；

（2）向（1）步驟所得產物中，加入連接分子，混合均勻后水浴中連接；

（3）構建基于特定生物分子的檢測系統；

（4）將（2）步驟所得產物應用到（3）步驟中的檢測系統中；或通過納米載體應用到（3）步驟中的檢測系統中。

4.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述長鏈DNA為合成的長鏈DNA、或噬菌體M13、或經過滾環擴增技術所得的長單鏈DNA；所述訂書釘鏈DNA，為多條能與長鏈DNA互補雜交的單鏈DNA，其中一條或多條為生物素修飾。

5.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，步驟（1）所述高溫為95℃，室溫為25℃，降溫時間為12小時以上。

6.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述連接分子為親和素、或鏈霉親和素?、或鏈霉親和素標記的辣根過氧化物酶。

7.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述與連接分子作用條件為25～37℃，水浴30分鐘以上。

8.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述特定生物分子為蛋白、抗原、腫瘤標志物、一段DNA，或RNA序列、多肽或腫瘤細胞。

9.根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述檢測系統為蛋白質微陣列芯片、或基因芯片、或微流控蛋白質芯片、或酶聯免疫吸附試驗，方式為三明治法、或間接法、或競爭法。

10.根據權利要求3所述根據權利要求3所述利用DNA納米折紙結構作為信號放大探針的檢測分析方法，其特征在于，所述納米載體為納米金、或納米銀、或磁性納米粒子。