[發明專利]一種甲啶鉑原料藥及其注射液含量的分析檢測方法

無效

• 申請號: 201410228710.X
• 申請日: 2014-05-28
• 公開（公告）號: CN104034812A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 陳宏;普紹平;欒春芳;叢艷偉;彭娟;張琪;邱學翁
• 申請（專利權）人: 昆明貴研藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

本發明涉及抗腫瘤藥物及注射液分析檢測方法，即通過高效液相色譜法檢測分析甲啶鉑及其注射劑中的雜質和有關物質。

背景技術

甲啶鉑屬于鉑族金屬配合物，是繼順鉑、卡鉑和奧沙利鉑之后的新一代鉑族金屬抗腫瘤藥物。甲啶鉑(picoplatin)又名吡鉑，代號NX473、JM473、AMD473、ZD0473，全稱順式-二氯-氨-(2-甲基吡啶)合鉑(Ⅱ)，分子量為376.16。

甲啶鉑結構式為：

甲啶鉑中心原子Pt和兩個N原子、兩個Cl-原子位于同一平面上，形成平面正方形結構，而2-甲基吡啶中的甲基位于此平面軸向。這種結構使得甲啶鉑與體內生物大分子的反應位阻效應增大，降低了藥物與生物大分子的反應速率，一定程度上克服了細胞自身的解毒作用，提高了甲啶鉑的抗癌活性，減輕了此藥物的毒副作用，同時也克服了某些細胞的順鉑耐藥性。

甲啶鉑最早由英國JohnsonMatthey公司，加拿大AnorMed公司和英國癌癥研究所共同開發，1997年開始進入臨床試驗研究階段，主要用于二線治療對現有鉑類藥物已有抵抗性的實體瘤，目前應用甲啶鉑治療小細胞肺癌的臨床試驗已經進入Ⅲ期，治療前列腺癌和結腸直腸癌的臨床試驗已經進入到Ⅱ期。作為二線化療藥物，在臨床治療小細胞肺癌(SCLC)的Ⅱ期實驗中，甲啶鉑對獲得順鉑耐藥性或者復發型的SCLC患者，治療效果達到預期指標，毒副作用主要表現為血液學毒性。但是在接下來的在一項名為“SPEAR”考查安全性和有效性的臨床Ⅲ期實驗中，與最好的支持治療相比，患者的死亡率降低11％，沒有達到統計學上的顯著效果。在治療晚期惡性固體瘤臨床Ⅰ期試驗中，甲啶鉑聯合聚乙二醇化脂質體阿霉素獲得理想效果。在治療轉移性結直腸癌(mCRC)Ⅱ期試驗中，甲啶鉑表現出了可與奧沙利鉑相比擬的臨床效果，并且在一線聯合化療試驗中聯合5-FU和亞葉酸產生更少的毒副作用，治療效果優于奧沙利鉑。在治療去勢抵抗性前列腺癌(CRPC)Ⅱ期試驗中，甲啶鉑聯合多系紫杉醇和強的松的研究獲得了預期效果。目前，甲啶鉑已獲得中國國家食品藥品監督管理局(SFDA)許可，將進行兩部分Ⅲ期臨床試驗，即以甲啶鉑治療小細胞肺癌(SCLC)與作為卵巢癌的二線藥物?？诜o藥也處于Ⅰ期臨床試驗中。

甲啶鉑在純化水中易發生水合反應而降解，反應過程如下：

一定濃度的Cl^-和一定的酸度有助于提高甲啶鉑在水溶液中的穩定性，但是如果酸性太低，或者溶液呈堿性，以及氧化劑和還原劑會降低甲啶鉑的穩定性。

由于甲啶鉑易水解，測定甲啶鉑及其注射劑含量時要注意同時分析檢測其降解產物。傳統方法由于檢測限和定量限低限制了應用，專利CN102590385A能很好地將甲啶鉑與其雜質分開，但是此方法并沒有將合成甲啶鉑的原料順鉑和三氯氨合鉑酸鉀列為雜質，也沒有報道有關降解產物的檢測分析。因此，需要建立一種靈敏度高，與雜質分辨率好，并且能夠檢測分析甲啶鉑在溶液中降解產物的方法。

目前尚未發現有關甲啶鉑高濃度注射劑的檢測分析報道。

上述甲啶鉑高濃度注射劑是指將甲啶鉑溶于聚乙二醇400和鹽酸氯化鈉溶液的混合液中配制而成的最高可含甲啶鉑15mg/ml的溶液，相關報道見專利CN101804025A。

發明內容

本發明涉及一種甲啶鉑及其注射液含量的分析檢測方法，此方法線性相關，理論塔板數、分辨率、拖尾因子、檢測限和定量限等均能滿足藥物分析檢測的要求，具有良好的精密度和回收率，檢測靈敏，方便快速，適用于甲啶鉑原料藥及其注射劑的測定，以及雜質和有關物質的分析。

本發明所述的分析檢測方法具體操作如下：

(1)采用高效液相色譜分析法，色譜條件為：采用C18為固定相，流動相為5％～30％乙腈水溶液，使用前預先混合并超聲脫氣，流動相流速為0.5ml/min～2.0ml/min，柱溫20℃～45℃，檢測波長為205nm～300nm。

(2)樣品溶液的配制：采用純化水或生理鹽水將樣品配制成含甲啶鉑0.01mg/ml～1.0mg/ml的溶液或者采用生理鹽水將甲啶鉑注射液稀釋為含甲啶鉑0.01mg/ml～2.0mg/ml的溶液。

(3)將5μL～20μL樣品溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進行分析。

上述分析檢測方法所述乙腈水溶液為將色譜純的乙腈溶液用純化水或者蒸餾水配制而成，優選15％乙腈水溶液。

上述分析檢測方法所述流動相流速為0.5ml/min～2.0ml/min，優選1.0ml/min。