[發(fā)明專(zhuān)利]一種以杜仲鮮葉生產(chǎn)綠原酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410228652.0
• 申請(qǐng)日: 2014-05-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103980121A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盛達(dá)成;肖文軍;劉家波;馮林
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 湖南天下康生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07C69/732
• 分類(lèi)號(hào): C07C69/732;C07C67/56;C07C67/62
• 代理公司: 長(zhǎng)沙正奇專(zhuān)利事務(wù)所有限責(zé)任公司 43113
• 代理人: 何為;李宇

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)綠原酸的方法，特別是一種以杜仲鮮葉生產(chǎn)綠原酸的方法。

背景技術(shù)

杜仲（Eucommia?Ulmoides?Olive）是杜仲科杜仲屬植物，落葉喬木。我國(guó)適應(yīng)杜仲生長(zhǎng)的地域十分廣闊，可用于種植杜仲的土地達(dá)1000萬(wàn)公頃以上，目前全國(guó)杜仲栽培面積約35萬(wàn)公頃，占世界杜仲種植總面積的99％以上，具有獨(dú)特的資源優(yōu)勢(shì)，我國(guó)每年可產(chǎn)葉400萬(wàn)噸。

綠原酸（Chlorogenic?acid，簡(jiǎn)稱(chēng)?CA）屬于苯丙素類(lèi)化合物，是一類(lèi)含有羧基和鄰二酚基的有機(jī)酸，化學(xué)名為3-咖啡酰奎尼酸。綠原酸廣泛存在于高等雙子葉植物和蕨類(lèi)植物中，主要存在于忍冬科忍冬屬、菊科蒿屬植物中，其中含量較高的植物主要有金銀花、杜仲、向日葵、可可樹(shù)、咖啡及沙棘等，金銀花中綠原酸含量最高，杜仲葉次之。市場(chǎng)上金銀花資源較少且售價(jià)高，用金銀花提取綠原酸成本較高，從杜仲資源中提取綠原酸可以解決以上問(wèn)題。

研究表明，綠原酸具有抑菌、抗病毒、抗炎、解熱、抗過(guò)敏等多種藥理功能，并可用于食品保鮮，可有效防止飲料和食品的腐敗變質(zhì)。賈敬亮等利用不同濃度的綠原酸作用原代培養(yǎng)的大鼠肝細(xì)胞，結(jié)果顯示，綠原酸對(duì)大鼠肝細(xì)胞有誘導(dǎo)作用，作用效果隨綠原酸濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì)。因此杜仲綠原酸被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生及食品行業(yè)。

目前分離純化綠原酸的方法主要有醇提水沉、鉛沉、乙醇或乙酸乙酯萃取、β-環(huán)糊精包含、樹(shù)脂分離等。姜新義比較分析了傳統(tǒng)索氏提取法與超聲波提取法，試驗(yàn)表明采用超聲波提取法所測(cè)的含量要高于傳統(tǒng)的索氏提取法測(cè)得的含量；劉宗林采用水提法通過(guò)正交試驗(yàn)確定杜仲中綠原酸、槲皮素等有效成分的提取次數(shù)、時(shí)間以及pH值；程德軍將杜仲葉粉先用氯仿除脂，乙醇超聲提取綠原酸，再經(jīng)適當(dāng)萃取除雜后，建立了兩次生產(chǎn)薄層色譜分離純化杜仲葉中的綠原酸的方法；汪洪武采用鉛鹽沉淀，酸化后用乙酸乙酯萃取，最后重結(jié)晶得到綠原酸純品；錢(qián)驊等對(duì)常見(jiàn)的17?種大孔樹(shù)脂對(duì)綠原酸的吸附率、吸附速度和解吸率進(jìn)行了全面的比較，結(jié)果表明，AAS的吸附容量最大，但較難被洗脫下來(lái)；NKA-9有較大的吸附容量、且易被解吸，洗脫峰較集中，分離效果較好；NKA-Ⅱ有較大的吸附容量，也較易被洗脫，但洗脫峰平緩而不集中。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是：針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種高效、綠色安全、低成本、高得率、高純度、適用于工業(yè)生產(chǎn)的以杜仲鮮葉提取綠原酸的方法。

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種以杜仲鮮葉生產(chǎn)綠原酸的方法，其包括以下步驟：

1）選擇5-8月份采摘的杜仲鮮葉經(jīng)過(guò)打漿機(jī)打漿；

2）加入4-8倍量的40-60℃，pH為4-7的純水后，采用20-40kHz頻率超聲波輔助提取30-60min，過(guò)濾得到杜仲綠原酸粗提液；

3）在杜仲綠原酸粗提液中加入1-3%重量的殼聚糖混合、絮凝進(jìn)行絮凝純化；

4）加入經(jīng)絮凝純化后的杜仲綠原酸粗提液重量1-3%的活性炭脫色10-30min得到杜仲綠原酸上樣液；

5）將4.0BV～8.0BV該杜仲綠原酸上樣液以2.0?BV/h～4.0?BV/h的流速通過(guò)HPD826樹(shù)脂的層析柱進(jìn)行吸附，至吸附飽和；然后用1BV～3BV的蒸餾水以1BV/h～3BV/h流速?zèng)_洗至無(wú)色，再用1BV～3BV的20%～95%體積濃度的食用乙醇以1BV/h～3.0?BV/h的流速分步洗脫，收集洗脫液，將洗脫液在-0.05～-0.09MPa、45～55℃條件下濃縮，回收食用乙醇，-0.05～-0.09MPa、40～60℃真空干燥，得到不同純度的綠原酸產(chǎn)品。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：

1?本發(fā)明經(jīng)過(guò)考察各個(gè)不同季節(jié)采集杜仲鮮葉中綠原酸的含量，確定采集杜仲葉的采集季節(jié)；

2?杜仲鮮葉經(jīng)過(guò)打漿之后提取，不僅完全消除了干燥過(guò)程中的綠原酸的損失，而且通過(guò)打漿機(jī)打漿可以破壞植物細(xì)胞壁的穩(wěn)定性，使得后續(xù)提取更充分。

3?本發(fā)明研究過(guò)程中采用超聲波輔助提取，超聲波具有空化效應(yīng)、機(jī)械效應(yīng)和熱效應(yīng)，不僅能夠大大縮短提取時(shí)間，綠原酸提取率也能得到有效的提高。

4?本發(fā)明考察了醇沉、鉛沉和殼聚糖絮凝幾種純化方式，分別優(yōu)化其工藝參數(shù)，得到結(jié)論，采用殼聚糖絮凝符合綠色安全、成本低廉的要求。